[发明专利]一种从人参中提取纯化竹节参皂苷Ⅵ的方法

说明书

一种从人参中提取纯化竹节参皂苷Ⅵ的方法，将人参粉碎，加入50％‑70％甲醇水溶液超声提取，提取液减压浓缩，浓缩液用水稀释，过大孔吸附树脂柱纯化，再经硅胶柱层析和制备液相进行分离纯化，得到纯度大于98％的竹节参皂苷Ⅵ。

技术领域：

本发明属于天然药物化学领域，具体涉及一种从人参中提取纯化竹节参皂苷Ⅵ的方法。

背景技术：

人参为五加科(Araliaceae)人参属植物人参的干燥根。现代研究表明，人参主要化学成分为皂苷、多糖、挥发油，有机酸，木质素，无机元素等，人参皂苷具有抗疲劳，活血化瘀，保护神经系统，抑制白血病细胞增殖，提高皮质激素水平，调节免疫功能，抗病毒，抗糖尿病等活性。人参皂苷主要分为达玛烷型，齐墩果酸型和奥克梯隆型。其中达玛烷型为四环三萜类物质，目前已分离得到的人参皂苷，绝大多数都是达玛烷三萜类及其衍生物。竹节参，为五加科植物竹节参PanarjaPonicusC.A.Mey.的干燥根茎。具有散瘀止血，消肿止痛，祛痰止咳，补虚强壮之功效。常用于痨嗽咯血，跌扑损伤，咳嗽痰多，病后虚弱。文献表明，竹节参中的皂苷多为齐墩果酸型，很少有达玛烷型。竹节参皂苷Ⅳ和竹节参皂苷Ⅴ均属于齐墩果酸五环三萜类，此类结构的皂苷在竹节参中的含量较多，二者在竹节参中的含量分别为1.98％、2.68％。竹节参总皂苷具有抗炎镇痛的功效，以竹节参为主药的复方竹节参片，在临床上用于治疗各项风湿疼痛病症。竹节参总皂苷还可用于疫苗佐剂的研究，具有毒副作用小，取材广泛等优势。竹节参皂苷Ⅵ属于达玛烷四环三萜类，此类结构的皂苷在竹节参中含量较少，竹节参皂苷Ⅵ在竹节参中的含量约为0.19％，因此分离单体和活性研究的文献较少。本发明提供了一种从人参中分离纯化竹节参皂苷Ⅵ的方法，为达玛烷型竹节参皂苷单体的分离提供了一种新的方法。

发明内容：

本发明的目的是提供一种从人参中提取分离高纯度竹节参皂苷Ⅵ的方法。

为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

将人参粉碎，加入有机溶剂的水溶液超声提取，优选甲醇水溶液提取，合并提取液，减压回收至无醇味，浓缩液用水稀释，过大孔吸附树脂柱纯化，再经硅胶柱层析和制备液相进行分离纯化；

所述有机溶剂水溶液的体积百分比为50％-70％；

所述大孔吸附树脂吸附后用50％-70％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩、干燥；大孔吸附树脂为D101、AB-8或者D4020。

所述硅胶柱层析的流动相为乙酸乙酯-乙醇-水＝6:1:0.1；

制备型高效液相色谱的流动相为乙腈-水＝29：71。

本发明的制备方法，具有高效、快速、产品纯度高且有机溶剂用量较少，绿色环保等优点。

具体实施方式:

下面将结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1:

取人参药材2kg，粉碎，加入16升70％甲醇水溶液超声提取5次，每次30分钟，合并提取液，减压浓缩，浓缩液用5倍水稀释，过D101大孔吸附树脂柱吸附，水洗至流出液无色，再用10倍柱体积70％乙醇水溶液洗脱，回收溶剂，减压浓缩得到提取物。提取物以乙酸乙酯-乙醇-水＝6:1:0.1为流动相进行硅胶柱层析(展开剂：氯仿-甲醇-水＝16：5：1和正丁醇-乙酸乙酯-水＝4:1:5)，得到含竹节参皂苷Ⅵ的皂苷粉末3.2g。将此样品用流动相溶解，在检测波长203nm下，以乙腈-水＝29：71为流动相利用制备型高效液相色谱仪进行纯化，收集含竹节参皂苷Ⅵ的流份，回收溶剂后冻干，得竹节参皂苷Ⅵ1.7g。将其核磁数据与文献报道的竹节参皂苷Ⅵ核磁数据对比，确定其为竹节参皂苷Ⅵ，经高效液相色谱仪检测，其纯度为98.7％。核磁数据及色谱条件如下。