[发明专利]一种杀虫白僵菌菌粉的工业化生产方法

说明书

本发明公开了一种杀虫白僵菌菌粉的工业化生产方法，其应用了一种杀虫白僵菌菌粉的培养基，该培养基包括斜面培养基、二级液体扩大培养基、三级固体扩大培养基；其生产方法包括斜面菌种培养、二级液体扩大培养、三级固体扩大培养、干燥、粉碎四个步骤。整个生产工艺过程都是相辅相成的，且满足自纤设计机理（生物发酵繁殖），生产出的白僵菌菌粉质量稳定，且形成了大规模的生产，减少了浪费，生产出来的白僵菌粉的活孢率在85%以上，提高了白僵菌粉的活孢率，产品的质量也提高了20%，大大改进了现有的白僵菌制剂的生产技术，提高白僵菌产量和质量，使菌剂生产实现工业化和标准化。

技术领域

本发明属于微生物杀虫剂技术领域，尤其涉及一种杀虫白僵菌菌粉的工业化生产方法。

背景技术

在害虫病原微生物中，因真菌致病的最多（细菌，病毒），居60%以上，而在昆虫的真菌病中，由白僵菌引起的占20%以上。可见，白僵菌是昆虫重要的病原菌之一。白僵菌在世界分布极广，欧、亚、非、澳、南北美洲都有，就国家来说有20-30个。白僵菌的寄主范围很广，主要寄生于鳞翅目、同翅目、膜翅目、直翅目等的200多种昆虫和螨类，而且致病力强，可用于防治松毛虫、玉米螟、大豆食心虫、高粱条螟、甘薯象鼻虫、马铃薯甲虫、茶叶毒蛾、 松针毒蛾、稻苞虫、稻叶蝉、稻飞虱等害虫，具有使用方便、对人畜安全、不污染环境、不杀害天敌、经济有效等优点，已成为我国防治森林害虫的主要微生物杀虫剂之一。但由于白僵菌制剂的生产方法比较落后，生产过程常遭大量杂菌污染，存在着质量不稳定等问题，使之无法形成大规范生产。如何改进白僵菌制剂的生产技术，提高白僵菌产量和质量，使菌剂生产实现工业化和标准化，是亟待解决的问题。

发明内容

发明的目的是提供一种杀虫白僵菌菌粉的工业化生产方法。

为实现以上目的，本发明采用的技术方案是：

一种杀虫白僵菌菌粉的工业化生产方法，其应用了一种杀虫白僵菌菌粉的培养基，该培养基包括斜面培养基、二级液体扩大培养基、三级固体扩大培养基；所述斜面培养基的组成成分以重量百分数计分别为：马铃薯20-25%、白砂糖1-3%、琼脂1-3%、余量水；所述二级液体扩大培养基的组成成分以重量百分数计分别为：黄豆粉1-3%、玉米粉1-3%、白砂糖1-3%、尿素0.02-0.1%、蛋白胨0.02-0.08%、磷酸二氢钾0.02-0.06%，余量水；所述三级固体扩大培养基的组成成分以重量百分数计分别为：麦麸60-70%、谷壳30-40%；所述黄豆粉、玉米粉的粒度为300-500目；所述马铃薯的制备方法为先将马铃薯去皮，再切片煮30min，过滤得到；

具体包括以下步骤：

步骤1、斜面菌种培养：取马铃薯、白砂糖、琼脂、水按比例混合制得斜面培养基，将原菌种放入斜面培养基接种，接种后的斜面培养基放入22-26℃恒温箱内培养，第1-2天着重检查有无细菌生长，如见斜面上有粘稠具光泽的薄膜出现即为细菌污染，应去掉，继续观察有无细菌生长，如有则重复上述操作至第15天，如无其他杂菌，则第一批斜面菌种制备完成；

步骤2、二级液体扩大培养：取黄豆粉、玉米粉、白砂糖、尿素、蛋白胨、磷酸二氢钾、水按比例混合制得二级液体扩大培养基，将配好的二级液体培养基装入容量为1000L的三角瓶内，装量为三角瓶容量的1/3，塞好瓶塞，高压灭菌，在无菌条件下每瓶接种一支试管步骤1制得的斜面菌种，接2-3瓶，接种后的二级液体扩大培养基置于往复式摇床上震荡10-14h，温度控制在22-26℃，频率80-100次/min，用电子显微镜检测孢子发芽率在85%以上即可做为二级液体菌种；

步骤3、三级固体扩大培养：取麦麸、谷壳按比例进行混合均匀制得三级固体扩大培养基，将5-10kg三级固体扩大培养基装入布袋或纤维袋，扎紧袋口置于灭菌锅炉中消毒，灭菌后的三级固体扩大培养基按20-25%的接种量加入步骤2制得的二级液体菌种，培养室及用具彻底消毒后，将接种后的三级固体扩大培养基平铺在簸箕内，厚度为0.6-1寸，进行浅盘发酵制得白僵菌；