[发明专利]一种烟用纸张中黄曲霉毒素的测定方法

说明书

本发明涉及一种烟用纸张中黄曲霉毒素的测定方法。该测定方法包括以下步骤：1)向烟用纸张样品中加入提取溶剂和提取盐进行提取，固液分离后收集液体部分得到提取液，将提取液稀释后过滤，得到滤液；2)将滤液流过黄曲霉毒素专用固相萃取柱，之后用水清洗黄曲霉毒素专用固相萃取柱，再用甲醇或乙腈进行洗脱，收集洗脱液即为待测液；3)将待测液进行液相色谱‑串联质谱分析。该测定方法的净化效率高、灵敏度高，适用于条包装纸、盒包装纸、框架纸、接装纸、内衬纸等多种烟用纸张中痕量黄曲霉毒素的高效测定。

技术领域

本发明属于烟草化学检验技术领域，具体涉及一种烟用纸张中黄曲霉毒素的测定方法。

背景技术

黄曲霉毒素为二氢呋喃香豆素的衍生物，主要为黄曲霉寄生曲霉产生的次生代谢产物，多出现于湿热环境下的粮食、食品和饲料中。黄曲霉毒素对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时可导致肝癌甚至死亡。黄曲霉毒素被世界卫生组织癌症研究机构划定为1类致癌物，是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素主要污染粮油食品和动植物食品等，常见的被污染对象有花生、玉米、大米、小麦、豆类、坚果类、肉类、乳及乳制品和水产品等。目前已经发现的黄曲霉毒素有20余种，根据其在紫外线照射下产生的荧光颜色不同，将其分为B族和G族两大类及其衍生物。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1最为多见，其毒性和致癌性也最强，在玉米、花生、棉花种子、干果中常能检测到黄曲霉毒素B1。因此，世界各国和组织均对各种食品中的黄曲霉毒素做了严格的限量标准，例如世界卫生组织规定的牛奶中黄曲霉毒素B1的最大允许量为0.5μg/kg。

条包装纸、盒包装纸、框架纸、接装纸和内衬纸等烟用纸张在储存、运输和加工过程中，有可能会产生霉变，不仅会造成经济损失，更重要的是会对产品的安全性造成影响，尤其是与口腔有直接接触的接装纸。因此，烟用纸张中黄曲霉毒素的测定显得尤为重要。

公布号为CN104280503A的中国专利申请公开了一种同时测定烟草中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的HPLC-FLD柱前衍生法，其是将烟末样品用甲醇溶液水浴超声萃取后过滤，将滤液稀释后通过免疫亲和柱，用纯水分两次淋洗免疫亲和柱，再用甲醇将免疫亲和柱上富集的四种黄曲霉毒素洗脱下来，将洗脱液吹干后加入三氟乙酸和正己烷，在45℃恒温衍生化40min，加入少量甲醇溶液，取下层溶液进行HPLC-FLD分析。该方法虽然实现了烟草中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测，但盒包装纸中黄曲霉毒素的含量较低，而且可能存在一定的基质干扰，该柱前衍生法的净化效率和灵敏度并不能满足烟用纸张中微量黄曲霉毒素的检测要求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种烟用纸张中黄曲霉毒素的测定方法，从而解决现有测定方法的净化效率和灵敏度较低的问题。

为实现上述目的，本发明的烟用纸张中黄曲霉毒素的测定方法所采用的技术方案是：

一种烟用纸张中黄曲霉毒素的测定方法，包括以下步骤：

1)向烟用纸张样品中加入甲醇水溶液和氯化钠进行提取，固液分离后收集液体部分得到提取液，将提取液稀释后过滤，得到滤液；

2)将滤液流过黄曲霉毒素专用固相萃取柱，之后用水清洗黄曲霉毒素专用固相萃取柱，再用甲醇进行洗脱，收集洗脱液即为待测液；

3)将待测液进行液相色谱-串联质谱分析。

本发明提供的烟用纸张中黄曲霉毒素的测定方法，通过选择合适溶剂对烟用纸张样品中的黄曲霉毒素进行提取，经高效净化后去除基质干扰，利用液相色谱-串联质谱分析快速、准确得到烟用纸张样品中黄曲霉毒素的含量。该测定方法的净化效率高、灵敏度高，适用于条包装纸、盒包装纸、框架纸、接装纸、内衬纸等多种烟用纸张中痕量黄曲霉毒素的高效测定。

步骤1)中，为进一步提高提取效率，改善提取效果，优选的，每5g烟用纸张样品，对应甲醇水溶液的用量为120-130mL，氯化钠的用量为3-7g；所述甲醇水溶液中，甲醇和水的体积比为(60-80)：(20-40)。