[发明专利]一种烟草及烟草制品中黄曲霉毒素的测定方法

说明书

本发明属于烟草成分检测技术领域，具体涉及一种烟草及烟草制品中黄曲霉毒素的测定方法。本发明的测定方法包括以下步骤：步骤一：配制含内标及4种黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的系列标准工作溶液，所述内标为同位素标记的4种黄曲霉毒素；步骤二：将待测样品与内标、溶剂和氯化钠混合，然后提取、固液分离，得样品提取液；步骤三：对样品提取液用黄曲霉毒素专用固相萃取柱进行萃取，然后解吸并收集解吸液作为样品待测液；步骤四：用液相色谱‑串联质谱分别对系列标准工作溶液和样品待测液进行分析。本发明的方法净化效率高、定量准确、适用范围广。

技术领域

本发明属于烟草成分检测技术领域，具体涉及一种烟草及烟草制品中黄曲霉毒素的测定方法。

背景技术

黄曲霉毒素为二氢呋喃香豆素的衍生物，主要为黄曲霉寄生曲霉产生的次生代谢产物，多出现于湿热环境下的粮食、食品和饲料中。黄曲霉毒素是一种毒性极强的剧毒物质，被世界卫生组织癌症研究机构划定为1类致癌物。烟草及相关制品在储存、运输和加工过程中有可能会产生霉变，对烟草的安全性造成影响。国外已有实验室证明在含水量较高的无烟气烟草中检测到黄曲霉毒素，因此，准确测定烟草及烟草制品中黄曲霉毒素含量对烟草行业尤为重要。

由于烟草及烟草制品基质的复杂性(共含有超过8000种化合物)，再加上黄曲霉毒素在上述样品中的含量有可能较低，因此需要一种能够定量准确、除杂能力强的测定方法。在已有的黄曲霉毒素含量的测定方法中，高效液相色谱-串联质谱具有重现性好、定量限低、效率高等优点。授权公告号为CN104678039B的中国专利中公开了一种基于液相色谱-串联质谱同时测定烟草及烟草制品中四种黄曲霉毒素含量的方法，该方法实现了对四种黄曲霉毒素的同时测定。但是烟草及烟草制品中黄曲霉毒素的含量极低，上述方法的检测限较高，并且检测结果受操作条件及仪器的影响较大，因此上述方法不能对烟草及烟草制品中黄曲霉毒素进行很好的定量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种烟草及烟草制品中黄曲霉毒素的测定方法，该方法具有较低的检测限和较高的净化效率，定量准确。

为实现上述目的，本发明的技术方案是：

一种烟草及烟草制品中黄曲霉毒素的测定方法，包括以下步骤：

步骤一：配制含内标及4种黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的系列标准工作溶液，所述内标为同位素标记的4种黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2；

步骤二：将待测样品与内标、溶剂和氯化钠混合，然后提取、固液分离，得样品提取液；

步骤三：对样品提取液用黄曲霉毒素专用固相萃取柱进行萃取，然后解吸并收集解吸液作为样品待测液；

步骤四：用液相色谱-串联质谱分别对系列标准工作溶液和样品待测液进行分析。

本发明的烟草及烟草制品中黄曲霉毒素的测定方法通过萃取对样品提取液进行净化，再用液相色谱-串联质谱仪对净化液进行分析，采用内标法测定烟草及烟草制品中黄曲霉毒素的含量。本发明的方法克服了现有测定技术中对样品净化没有选择性、净化效率不高等不足。本发明的测定方法中每种黄曲霉毒素均有相应的同位素内标进行定量，具有针对性。本发明的测定方法中四种黄曲霉毒素的检测限均在0.2μg/kg以下，检测限低，定量准确。因此，本发明的方法具有净化效率高、灵敏度高、快速准确、适用范围广等优点，能极大地提高测试效率、降低仪器维护成本。

步骤二所述溶剂为甲醇水溶液或乙腈水溶液，使用有机溶剂利用相似相溶原理从烟草及烟草制品中浸取目标分析物。

为保证烟草及烟草制品中的黄曲霉毒素被充分提取，步骤二所述提取为涡旋提取。

上述烟草制品为卷烟填充物、无烟气烟草制品、雪茄烟中的一种。本发明的方法适用于多种烟草制品，使用范围广。