[发明专利]赶黄草总黄酮含量测定方法

说明书

本发明为赶黄草总黄酮含量测定方法，属于中药质量控制领域。本发明公开了一种赶黄草(含茎、叶、花)及其茎、叶、花等不同药用部位的总黄酮含量测定方法。该方法为紫外分光光度法，以乔松素(或其7位羟基衍生物)为对照品，AlCl₃为显色剂，在310nm波长下，测定梯度标准溶液吸光度，建立标准曲线，再测定待测液吸光度，根据标准曲线计算赶黄草及其不同部位总黄酮含量，与现有技术比较，本发明更具有合理性，测得的赶黄草及其不同药用部位总黄酮含量的结果更准确。本发明适用于以赶黄草或其不同部位为原料和提取物的质量控制。

一、技术领域

本发明属于中药质量控制领域，涉及一种赶黄草及其不同部位总黄酮的含量测定方法。

二、背景技术

赶黄草是虎耳草科扯根菜属植物扯根菜Penthorum chinense pursh.的干燥地上部分，为苗族民间草药，主产于四川、贵州、湖南等地，为泸州古蔺道地药材。赶黄草又名扯根菜、水泽兰、水杨柳、山黄鳝。赶黄草性平、味苦、微辛、无毒、归肝、肾经。具有清热解毒、退黄化湿、活血散瘀、利水消肿之功效，广泛用于治疗各型肝炎、胆囊炎、脂肪肝等。

赶黄草含黄酮类、木脂素类、香豆素类、苯乙酮类、鞣质类、三萜类、有机酸类、酯类和挥发油等化学成分，其中以黄酮类化合物居多，是其主要成分，也是其功效成分。赶黄草中的黄酮类化合物主要由乔松素及其苷、槲皮素及其苷、山奈酚及其苷、柚皮素及其苷等组成。赶黄草总黄酮具有抗氧化、抗肝纤维化、缓解体力疲劳、治疗酒精性肝损伤和非酒精性脂肪肝等作用。

目前虽有赶黄草总黄酮的含量测定报道，但都是以芦丁为对照，以NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH显色，利用可见分光光度法，在510nm处测定吸光度，再通过芦丁标准曲线计算赶黄草总黄酮的含量(1.中国实验方剂学杂志，2012，18(18)：38-41；2.吉林畜牧兽医，2018，39(6)：5-9；3.泸州医学院学报，2010，33(4)：370-372)，该方法中赶黄草总黄酮的吸收光谱图与芦丁存在极大差异，而且最大吸收波长也不一致(图1)，因而其合理性及测定结果准确性有待商榷。

为使赶黄草总黄酮含量测定更具合理及结果更准确，本发明以乔松素(或其7位羟基衍生物)为对照，以AlCl₃显色，利用紫外分光光度法建立赶黄草总黄酮含量测定方法。并对赶黄草(含茎、叶、花，下同)及其茎、叶、花等不同部位的总黄酮含量进行测定并比较，旨在为赶黄草合理开发和综合利用提供依据。

三、发明内容

本发明旨在建立一种合理测定赶黄草总黄酮的含量方法。本发明方法简便，准确，重复性好，为赶黄草及其不同部位质量控制提供了依据。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

1.对照品溶液的配制 精密称取乔松素(或其7位羟基衍生物)对照品12.5mg，加甲醇溶解，转移至25mL容量瓶中，甲醇定容，即得浓度为0.5mg·mL^-1的对照品溶液。

2.供试品溶液的制备 精密称取待检药材约1g至25mL圆底烧瓶中，加入10mL的55％乙醇溶液，加热回流提取3次，每次1.5h，过滤，合并滤液，减压浓缩，真空干燥得赶黄草提取物。提取物精密称定，以甲醇溶解后，转移至50mL容量瓶，加甲醇定容，即得供试品溶液。

3.标准曲线的绘制 分别精密移取乔松素(或其7位羟基衍生物)对照品溶液0.0，0.2，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0mL于10mL容量瓶中，加入1mL的1％三氯化铝甲醇溶液，甲醇定容至刻度，室温放置10min，于310nm处测其吸光度，以浓度C(mg·mL)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归分析。

4.赶黄草及其不同部位总黄酮含量测定