[发明专利]一种浓缩活心丸的质量检测方法

权利要求书

1.一种浓缩活心丸的质量检测方法，所述浓缩活心丸的处方为：灵芝20g，人工麝香1.2g，熊胆2.4g，体外培育牛黄1.2g，珍珠2.4g，人参18g，蟾酥1.8g，附子9g，冰片1.2g，红花2.0g；其特征在于所述浓缩活心丸的质量检测方法包括如下鉴别和含量测定方法：

(一)鉴别方法：

(1)麝香酮的薄层鉴别:取所述浓缩活心丸0.8g，研细，加乙醚15ml，超声处理15分钟，滤过，滤渣备用，滤液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取麝香酮对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃的石油醚-乙酸乙酯＝20:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(2)冰片的薄层鉴别:取冰片对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取(一)鉴别方法(1)麝香酮的薄层鉴别项下的供试品溶液及上述对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯＝17:3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)蟾酥的薄层鉴别:取(一)鉴别方法(1)麝香酮的薄层鉴别项下的备用滤渣，挥尽乙醚，加乙醇15ml，超声处理15分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取蟾酥对照药材20mg，自“加乙醇15ml”起，同法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-二氯甲烷-丙酮＝4:3:3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在紫外光365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(4)熊胆的薄层鉴别:取所述浓缩活心丸0.4g，研细，加乙醚，密塞，冷浸3次，每次10ml，每次浸渍30分钟，药渣挥去乙醚，加甲醇20ml，置水浴上加热回流1小时，滤过，取续滤液10ml，蒸干，残渣加20％氢氧化钠溶液0.5ml，置水浴中加热10小时，取出后，用盐酸调节pH值至显酸性，放冷，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚提取液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊胆对照药材100mg，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水＝10∶5∶5∶3∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以30％硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰，分别在日光和紫外光365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光斑点；

(5)人参的薄层鉴别:取所述浓缩活心丸0.8g，研细，加三氯甲烷30ml，加热回流1小时，滤过，滤渣挥干溶剂，加水饱和的正丁醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去洗液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷Rg₁对照品、人参皂苷Re对照品及人参皂苷Rb₁对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一Merck硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝65：35：10在10℃以下放置形成的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别在日光和紫外光365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点和荧光斑点；

(二)含量测定方法：

(1)体外培育牛黄：

对照品溶液的制备：取胆红素对照品适量，精密称定，加二氯甲烷制成每1ml含胆红素对照品15μg的溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：取供试品，研细，取约50mg，精密称定，置具塞容器中，加入含0.15％十六烷基三甲基氯化铵的10％草酸溶液3ml，涡旋至充分混匀，精密加入水饱和的二氯甲烷25ml，称定重量，超声处理后，放冷，再称定重量，用水饱和的二氯甲烷补足减失的重量，摇匀，离心，取二氯甲烷液，用孔径为0.22μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

测定法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，色谱条件与系统适用性为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，一乙腈-1％冰醋酸溶液＝95:5为流动相，检测波长为450±2nm；测定，即得；

所述浓缩活心丸每1g含体外培育牛黄以胆红素计，不得少于5.5mg；

(2)蟾酥：

对照品溶液的制备：取华蟾酥毒基、脂蟾毒配基对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含华蟾酥毒基30μg、脂蟾毒配基20μg的混合溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：取供试品，研细，取约0.4g，精密称定，置具塞容器中，精密加入乙醇20ml，称定重量，超声处理后，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

测定法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，色谱条件与系统适用性为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以用磷酸调节pH值至3.2的乙腈-0.5％磷酸二氢钾溶液＝44:56为流动相；检测波长为296nm，理论板数按华蟾酥毒基峰计算应不低于3000；测定，即得：

所述浓缩活心丸每1g含蟾酥以华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的总量计，不得少于1.8mg；

(3)人工麝香、冰片：

对照品溶液的制备：取麝香酮对照品、异龙脑对照品与龙脑对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含麝香酮0.01mg、异龙脑0.08mg及龙脑0.1mg的混合溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：取供试品，研细，取约0.2g，精密称定，置具塞容器中，精密加入无水乙醇20ml，称定重量，超声处理后，放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

测定法：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入气相色谱仪，色谱条件与系统适用性试验为：聚乙二醇20000毛细管柱，柱长为30m，内径为0.25mm，膜厚度为0.25μm；柱温为程序升温：初始温度为110℃，保持11分钟，以每分钟30℃的速率升温至200℃，保持9分钟；理论板数按龙脑峰计算应不低于2000；测定，即得：

所述浓缩活心丸每1g含人工麝香以麝香酮计，不得少于1.0mg；含冰片以异龙脑与龙脑的总量计，不得少于13.5mg。