[发明专利]浓缩活心丸中体外培育牛黄含量的检测方法

说明书

本发明属于药物检测领域，公开了一种浓缩活心丸中体外培育牛黄含量的检测方法。所述浓缩活心丸中体外培育牛黄含量以高效液相色谱法测定，避光操作，检测条件及方法如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈‑1％冰醋酸溶液＝95:5为流动相；检测波长为450nm；先制备对照品溶液与供试品溶液，然后精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。浓缩活心丸每1g含体外培育牛黄以胆红素(C33H36N4O6)计，不得少于5.5mg。本发明所述浓缩活心丸中体外培育牛黄含量的检测方法具有准确度高、精密度好、专属性强的优点，能够很好的对浓缩活心丸中体外培育牛黄的含量进行测定，指导浓缩活心丸质量控制。

技术领域

本发明涉及属于药物检测领域，具体涉及一种浓缩活心丸中体外培育牛黄含量的检测方法。

背景技术

体外培育牛黄具有清心，豁痰，开窍，凉肝，熄风，解毒的功效。用于热病神昏，中风痰迷，惊厥抽搐，癫痫发狂，咽喉肿痛，口舌生疮，痈肿疔疮。体外培育牛黄是国家一类中药新药，药学研究表明体外培育牛黄的性状、结构、成分及其含量、药理、临床疗效与天然牛黄基本一致，无明显不良反应。牛黄中的胆红素是解热、抗炎和抗感染的主要活性成分，以胆红素作为指标成分对牛黄进行含量测定是科学、合理的。

体外培育牛黄是浓缩活心丸中的一种成分，活心丸为2010年度国家药品标准提高品种，由广州悦康生物制药有限公司生产。现行标准收载于部颁标准中药成方制剂第十八册(标准文号：WS3-B-3452-98)。在原标准中并没有关于体外培育牛黄的含量测定，因此有必要为其提供一种专属性强、精密度好的体外培育牛黄含量的检测方法，更好的对浓缩活心丸的质量进行全面的控制。

发明内容

本发明是要解决活心丸质量检测原有标准中没有对体外培育牛黄进行定量测定的问题，提出的一种浓缩活心丸中体外培育牛黄含量的检测方法，提高对浓缩活心丸的质量控制。

本发明提供的浓缩活心丸中体外培育牛黄含量的检测方法，所述浓缩活心丸的处方为：灵芝20g，人工麝香1.2g，熊胆2.4g，体外培育牛黄1.2g，珍珠2.4g，人参18g，蟾酥1.8g，附子(黑顺片)9g，冰片1.2g，红花2.0g；，所述浓缩活心丸中体外培育牛黄含量的检测方法包括以下几个步骤：步骤1、对照品溶液的制备：取胆红素对照品适量，精密称定，加二氯甲烷制成每1ml含15μg的溶液；步骤2、供试品溶液的制备：取所述浓缩活心丸，研细，取约50mg，精密称定，置具塞容器中，精密加入含0.15％十六烷基三甲基氯化铵的10％草酸溶液3-10ml，涡旋至充分混匀，精密加入水饱和的二氯甲烷25ml，称定重量，超声处理45-60min后，放冷，再称定重量，用水饱和的二氯甲烷补足减失的重量，摇匀，离心，取二氯甲烷液，用孔径为0.22μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；步骤3、精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

进一步优化为，在步骤2中加入含0.15％十六烷基三甲基氯化铵的10％草酸溶液量为3ml。

进一步优化为，在步骤2中超声处理要求为：功率350W,频率37kHz，处理45min。

进一步优化为，在步骤3中色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1％冰醋酸溶液(95:5)为流动相；检测波长为450nm。