[发明专利]一种用于出土面食文物的鉴定方法

说明书

本发明属于文物科技保护技术领域，具体涉及一种用于出土面食文物的鉴定方法。该方法首先对出土面食文物进行前处理，之后将处理后的样品用固相萃取柱脱盐、真空干燥后，溶于缓冲液；离心处理，收集上清液，进行高效液相色谱分析检测，再然后进行串联质谱分析；最后选择蛋白数据库进行检索。采用本发明提出的一种用于出土面食文物的鉴定方法根据鉴定出残留蛋白的来源，推断出面食制作原料植物和发酵微生物，实现出土面食的鉴定。鉴定的准确性和成功率明显提高。

技术领域

本发明属于文物科技保护技术领域，具体涉及一种用于出土面食文物的鉴定方法。

背景技术

面食是以谷物粉为原料，经过发酵等工艺制作而成的食物，它的历史可上溯到新石器时代。出土面食文物多发现于出土陶瓷器、金属器内部。经过了长期保存，其外观及内部含有的物质都会发生明显变化，变化的程度与埋藏环境及年代有关。如果要确定某一出土容器中的文物究竟是否为古代面食，需要采用科学的手段进行鉴定，为研究我国古代饮食文化、植物驯化、古代食谱、社会结构等提供基础信息。

本发明提出的方法以出土面食含有的古蛋白残留物作为标志物，发现其制作原料种类及发酵微生物实现出土面食文物的精确鉴定。目前常用的鉴定方法是古植物形态学法，根据样品中残留的植硅石、淀粉粒等微观植物遗存进行出土面食文物的鉴定。然而，这类遗存保存难度极大，在实际工作中鲜有成功案例。与本发明提出的方法相比，古植物形态学法准确度较低，并且无法揭示面食是否经过发酵，因而无法提供古代面食的加工工艺信息。此外，经过长期的降解，古蛋白残留物比微观植物遗存更可能保存下来，因此成功率更高。

发明内容

发明目的：一种用于出土面食文物的鉴定方法，以解决传统面食文物鉴定技术准确度低、标志物不易保存的问题。

技术方案：一种用于出土面食文物的鉴定方法，包括以下步骤：

步骤一：样品前处理，所述前处理方法为：提取并分离后的含古代面食标志物的凝胶样品依次经过脱色-脱水-保温-再脱水-酶解-干燥；

步骤二：将步骤一处理后的样品用固相萃取柱脱盐、真空干燥后，溶于缓冲液A；离心处理，收集上清液，进行高效液相色谱分析检测，洗脱液为缓冲液B。所述缓冲液A为2％乙腈，0.1％甲酸；所述的缓冲液B为98％乙腈，0.1％甲酸；

步骤三：串联质谱分析；

步骤四：数据库检索。

优选的，样品脱色方法为：将含有出土面食文物样品提取物的凝胶的着色区域切成多个约1mm²的小块，分别用25mM的碳酸氢铵和50％的乙腈脱色2次，每次1h。

优选的，脱水处理时选用500μL 100％的乙腈。

优选的，高效液相色谱分析条件：用自动进样器加入高效液相色谱的自制2cm C18柱及10cm C18柱(内直径75μm)中。样品加入的速率是15μL/min持续4min，洗脱速率为400nL/min持续91min，洗脱液浓度从2％线性增加到35％，然后在5min内线性增加到80％后持续8min，最终回到2％持续2min。

优选的，串联质谱分析条件：质谱分辨率为60,000；串联质谱分析采用碰撞诱导解离模式，标准碰撞能量为35％，离子碎片用线性离子阱检测；10个丰度最高的离子计数在5000以上的母离子进入二级质谱分析；电喷雾电压为1.5kV；采用自动增益控制来防止离子阱过满，在离子阱中累积1×10⁴个离子来产生二级质谱；质荷比范围是350-2,000Da。