[发明专利]一种羟基自由基的比色检测方法及其应用有效
申请号: | 201811201942.0 | 申请日: | 2018-10-15 |
公开(公告)号: | CN109060694B | 公开(公告)日: | 2021-01-22 |
发明(设计)人: | 刘芳;邓涛;胡世友 | 申请(专利权)人: | 广州中医药大学(广州中医药研究院) |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N1/28 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 颜希文;宋静娜 |
地址: | 510000 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 羟基 自由基 比色 检测 方法 及其 应用 | ||
1.一种羟基自由基的比色检测法,其特征在于,包括以下步骤:
S1)配置羟基自由基标准液;
S2)向羟基自由基标准液和样品中分别加入5-硝基咪唑溶液,反应生成亚硝酸根离子;
S3)再将步骤S2反应生成的亚硝酸根离子加入到对氨基苯磺酰胺磷酸溶液和N-1-萘基乙二胺水溶液的混合溶液中,室温避光条件下反应后测定吸光值;
S4)绘制羟基自由基标准液的标准曲线,并计算样品中羟基自由基的浓度。
2.如权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,所述羟基自由基标准液的浓度为0~25μM。
3.如权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,所述5-硝基咪唑溶液的溶剂为纯水或磷酸缓冲液。
4.如权利要求1所述的比色检测法,其特征在于,在步骤S3)中,反应的温度为25℃,反应的时间为10min,测定吸光值采用的波长为540nm。
5.如权利要求1~4任一项所述的比色检测方法用于检测Fenton反应、X射线照射或青蒿素生成的羟基自由基。
6.一种用于检测羟基自由基的试剂盒,其特征在于,包括羟基自由基标准品溶液、5-硝基咪唑溶液、对氨基苯磺酰胺磷酸溶液和N-1-萘基乙二胺水溶液,所述对氨基苯磺酰胺磷酸溶液呈酸性。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述羟基自由基标准液的浓度为0~25μM。
8.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述5-硝基咪唑溶液的溶剂为纯水或磷酸缓冲液。
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