[发明专利]耐热性乳酸菌微胶囊的制备方法

权利要求书

1.一种耐热性乳酸菌微胶囊的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

（1）配置用于乳酸菌培养的MRS液体培养基与MRS固体培养基；

（2）配置壁材溶液：海藻酸钠（SA）粉末加入水中，加热溶解，过滤除菌后制得 1.5-2.5%质量浓度的SA溶液；壳聚糖（CS）粉末加入质量浓度1-1.5%的冰醋酸水溶液中振荡，制得1-2%质量浓度的CS溶液，并调节CS溶液的pH值在4.0-5.0范围内；

（3）配置固化剂：将CaCl₂颗粒与水混合制得质量浓度为1-2%的CaCl₂溶液，灭菌后冷却至室温备用；

（4）配置微胶囊释放剂：称取适量NaHCO₃与柠檬酸钠粉末，溶于双蒸水，制得含有0.2MNaHCO₃和0.06M柠檬酸钠混合溶液，调节pH值至7.8±0.1，经121℃ 15min灭菌后，冷却至室温备用；

（5）乳酸菌菌液的制备；

（6）微胶囊的制备：将乳酸菌菌液和SA以1:0.5-1的重量比混合得到混合液，用注射器将混合液滴入CaCl₂固化剂中形成海藻酸钙微囊，搅拌使微囊充分凝固，然后将微囊转移入pH值为4.0-5.0的CS溶液中搅拌悬浮1-2小时制得微胶囊。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

（1）配置用于乳酸菌培养的MRS液体培养基与MRS固体培养基；

（2）配置壁材溶液：海藻酸钠（SA）粉末加入水中，在70-75℃水浴锅中加热溶解，0.22μm滤膜过滤除菌，制得 2%质量浓度的SA溶液；壳聚糖（CS）粉末加入质量浓度1-1.5%的冰醋酸水溶液中振荡，制得1-2%质量浓度的CS溶液，并调节CS溶液的pH值在4.0-5.0范围内；

（3）配置固化剂：将CaCl₂颗粒与水混合制得质量浓度为1-2%的CaCl₂溶液，经121℃15min灭菌后，冷却至室温备用；

（4）配置微胶囊释放剂：称取适量NaHCO₃与柠檬酸钠粉末，溶于双蒸水，制得含有0.2MNaHCO₃和0.06M柠檬酸钠混合溶液，调节pH值至7.8，经121℃ 15min灭菌后，冷却至室温备用；

（5）乳酸菌菌液的制备；

（6）微胶囊的制备：将乳酸菌菌液和SA以1:0.5-1的重量比混合得到混合液，用注射器将10mL混合液滴入100mL CaCl₂固化剂中形成海藻酸钙微囊，磁力搅拌器600-750rpm/min转速搅拌30-45min，使微囊充分凝固，然后将微囊转移入50mL pH值为5.0的CS溶液中搅拌悬浮1-2小时制得微胶囊。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（5）乳酸菌菌液的制备为：将-80℃冰箱中冻存的乳酸菌菌液以1:100的比例加入MRS液体培养基，在37℃恒温培养箱中复苏18h，再以同样的条件转接一代；菌液经过4000rpm速度离心，去上清，用无菌生理盐水冲洗，同样的方法重复清洗2-3遍，使用无菌生理盐水将洗净的乳酸菌菌泥悬浮，得到10⁸数量级的乳酸菌菌液备用。