[发明专利]一种稳定同位素标记的呋喃唑酮代谢物及其合成方法

说明书

本发明公开了一种稳定同位素标记的呋喃唑酮代谢物及其合成方法。该合成方法包括以下步骤：S1：稳定同位素标记的2‑溴乙醇与水合肼反应合成稳定同位素标记的2‑肼基乙醇；S2：稳定同位素标记的2‑肼基乙醇与碳酸二甲酯反应合成稳定同位素标记的呋喃唑酮代谢物。本发明首次提供了稳定同位素标记的呋喃唑酮代谢物的合成方法，其稳定同位素标记原料价廉易得，合成过程简单，产品容易分离提纯，得到的产品化学纯度与同位素丰度均达到99％以上，满足作为定量检测呋喃唑酮代谢物的标准试剂的要求；使用价值高、具有良好的经济性。

技术领域

本发明涉及同位素标记领域，特别是涉及一种稳定同位素标记的呋喃唑酮代谢物及其合成方法。

背景技术

呋喃唑酮(Furazohdone，FZ)即3-(5-硝基糖醛缩氨基)-2-恶唑烷酮，又名痢特灵，属广谱抗生素药物，因其抗菌效果好曾被广泛用于水产动物疾病防治。然而该药物也是一种癌病诱变剂，其在体内的代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone，AOZ)不但与组织中蛋白质结合难以消除，而且与蛋白结合后释放出一种诱导机体突变的物质，是一种致癌作用很强的物质。因此，水产食品中FZ的残留及其代谢物对人体健康构成了潜在的危害。目前，美国、日本及我国均禁止在水产养殖中使用该药，水产品出口中要求不得检出FZ和AOZ。但个别养殖户不顾国家禁令继续使用该药物，对水产品的食用安全构成了严重危害。因此，对该类药物在水产品中的残留检测及其监管十分迫切和必要。

传统的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS)以及免疫分析法，但是这些方法普遍存在灵敏度低，方法繁琐，或只能进行半定量分析等缺点。而新发展起来的稳定同位素稀释质谱法(Isotope Dilution Mass Spectrometry，IDMS)是采用与被测物质具有相同分子结构的稳定同位素标记的化合物作为内标物质，用高分辨液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)进行检测，通过质谱仪测量相应质量数的离子的比值并与标准的比值比较达到准确定量的目的。采用同位素内标可以有效消除样品在化学和物理的前处理步骤中所引起的回收率差异，从而避免处理样品过程中的损失对检测结果造成的偏差。稳定同位素内标的特性与LC-MS的高灵敏度和处理复杂样品的能力结合，使得色谱-同位素稀释质谱技术被公认为测量微量及痕量有机物的基准定量方法，应用越来越广泛。

虽然AOZ的合成方法已有文献报道(Journal of China PharmaceuticalUniversity,2001,32(3),237-238；Med.Chem.Commun.,2015,6,1086-1092；CN102086194B)，但是由于同位素标记原料价格较贵，成本较高、生产工艺较难实现、如何保证生产过程同位素原子不会脱落、产品纯化等技术难点，稳定同位素标记的AOZ的合成方法尚未见报道，这严重制约了我国食品安全领域兽药残留检测行业的发展。因此，有必要提供一种稳定同位素标记的AOZ的合成方法，能得到化学纯度和同位素丰度均非常高的AOZ-D4，这将为IDMS定量检测食品残留物呋喃唑酮代谢物提供标准试剂，从而有效的为我国食品安全领域兽药残留检测服务。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种稳定同位素标记的呋喃唑酮代谢物及其合成方法，可以作为IDMS法定量检测AOZ的标准试剂；且制备过程简单，产品容易分离提纯，得到的产品化学纯度高。

本发明为解决上述技术问题而采用的技术方案是提供一种稳定同位素标记的呋喃唑酮代谢物的合成方法，包括以下步骤：S1：将稳定同位素标记的2-溴乙醇与水合肼反应，制得稳定同位素标记的2-肼基乙醇；S2：将所述稳定同位素标记的2-肼基乙醇与碳酸二甲酯反应，制得稳定同位素标记的呋喃唑酮代谢物。