[发明专利]一种三金制剂化学成分的分离纯化方法

权利要求书

1.一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，所述的分离纯化方法包括以下步骤：

(1)将三金制剂药物粉末采用有机溶剂进行提取，滤过，减压浓缩制得浸膏；

(2)将浸膏溶解，溶液依次采用石油醚、正丁醇进行萃取，获得正丁醇萃取浸膏；

(3)取正丁醇萃取浸膏进行硅胶柱层析，采用二氯甲烷-甲醇系统进行梯度洗脱，收集各洗脱流分，合并划分为多组粗洗脱部分；

(4)将各组的粗洗脱部分依次利用反相色谱柱层析、葡聚糖凝胶柱层析以及高效液相制备分离纯化，获得各个化学成分；

其中，获得的化学成分包括丁香脂素、树脂酚、二氢山柰酚、山柰酚、3,4-二羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、3-甲氧基-4-羟基苯甲酸、4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸、香豆酸、2-糠酸、3-羟基-2-(3-甲氧基-4-羟基苯基)丙酸、水杨酸、槲皮素、茋木脂体、原茶儿酸、3,4-二羟基苯丙烯酸、3’-二-O-甲基鞣花酸-4’-O-L-吡喃鼠李糖苷、没食子酸、山柰酚-3-葡萄糖苷以及一种新的三萜皂苷化合物，其结构式为：

2.根据权利要求1所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的有机溶剂为体积分数为10-100％的甲醇溶液或体积分数为10-100％的乙醇溶液。

3.根据权利要求2所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的有机溶剂为体积分数为60-95％的乙醇溶液。

4.根据权利要求1所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，将浸膏用水溶解，水溶液用石油醚进行萃取，弃掉石油醚层，水层用正丁醇进行萃取，减压回收溶剂，获得正丁醇萃取浸膏；其中，水溶液与石油醚的体积比为1:1～1:5；水层与正丁醇的体积比为1:1～1:5。

5.根据权利要求4所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，水溶液与石油醚的体积比为1:1～1:3；水层与正丁醇的体积比为1:1～1:2。

6.根据权利要求1-5任一所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(3)中，采用二氯甲烷-甲醇系统对萃取物进行梯度洗脱，二氯甲烷和甲醇的体积比为100:1-5:1，分段收集获得130份组分，通过TLC和HPLC-UV分析检测，筛选合并后分为五组粗洗脱部分，分别为组分6-9，组分20-36，组分37-51，组分66-95，组分118-130。

7.根据权利要求6所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(3)中，采用二氯甲烷-甲醇系统对萃取物进行梯度洗脱时，分别依次以二氯甲烷和甲醇的体积比为50:1、40:1、30:1、20:1、10:1、5:1进行洗脱。

8.根据权利要求1-5任一所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(4)中，进行反相色谱柱层析时，层析柱为ODS-C₁₈，洗脱溶剂为体积分数为10％-90％的甲醇水溶液，进行梯度洗脱；洗脱溶剂的用量为2～10个柱体积。

9.根据权利要求8所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(4)中，进行反相色谱柱层析时，分别依次以甲醇的体积分数为10％、20％、50％、70％、90％的洗脱溶剂进行洗脱。

10.根据权利要求6所述的一种三金制剂化学成分的分离纯化方法，其特征在于，步骤(4)中，进行反相色谱柱层析时，组分6-9和组分20-36采用体积分数为30％-90％的甲醇水溶液进行梯度洗脱；组分37-51、组分66-95以及组分118-130采用体积分数为10％-90％的甲醇水溶液进行梯度洗脱。