[发明专利]一种测定生物基质中海藻糖浓度的方法

权利要求书

1.一种测定生物基质中海藻糖浓度的方法，其特征在于：所述方法基于液相色谱质谱法结合柱后泵入辅助试剂实现浓度测定。

2.根据权利要求1所述测定生物基质中海藻糖浓度的方法，其特征在于包括步骤：

预制待测样品、通过蛋白沉淀法对定量吸取的生物基质进行前处理，去除干扰海藻糖含量测定的蛋白质沉淀；

定量分析、将前处理后所得的待测样品转移至色谱柱，通过柱后泵入辅助试剂在质谱仪中进行液相色谱质谱分析，得到每毫升纳克级的浓度结果。

3.根据权利要求2所述测定生物基质中海藻糖浓度的方法，其特征在于：所述前处理步骤为：先将生物基质转移至处理容器，使用相对生物基质4倍样品体积的乙腈涡旋混匀、并作离心处理，得到作为待测样品的上清液和作为干扰物的底部沉淀物。

4.根据权利要求3所述测定生物基质中海藻糖浓度的方法，其特征在于：所述离心处理的转速介于3200-4000转/分钟，离心时间介于5-20分钟。

5.根据权利要求2所述测定生物基质中海藻糖浓度的方法，其特征在于：所述前处理步骤中在生物基质中加入20%样品体积的内标甲醇溶液。

6.根据权利要求1所述测定生物基质中海藻糖浓度的方法，其特征在于：定量分析中，柱后泵入的所述辅助试剂为含5%氨水的乙腈溶液，且泵入辅助试剂的流速为0.1ml/分钟。

7.根据权利要求1所述测定生物基质中海藻糖浓度的方法，其特征在于：所述液相色谱质谱分析中第一流动相为去离子水，第二流动相为乙腈，且两流动相由各自的泵驱动汇入色谱柱前的进样器。

8.根据权利要求1所述测定生物基质中海藻糖浓度的方法，其特征在于：定量分析中所用质谱仪的型号条件为Sciex 4000或更高型号。