[发明专利]提高重组HpaA对幽门螺旋杆菌感染保护的脂肽及其激发机体免疫应答的方法和制剂

说明书

本发明涉及一种可提高重组HpaA对幽门螺旋杆菌感染保护作用的脂肽，以及一种激发机体对幽门螺旋杆菌免疫应答的方法和制剂，脂肽包括LP1或LP2；所述LP1为PamCys‑Peptide；所述LP2为Pam₂Cys‑Peptide；Peptide为肽段SPHIIETNEV。方法为将脂肽与重组HpaA混合后作用于机体。制剂包括重组HpaA和脂肽。本发明通过生物信息学预测了天然HpaA脂质化位点，根据其激活TLR2活性部位的结构，合成了两个新型脂肽LP1和LP2，无明显细胞毒性，激活TLR2活性呈现剂量依赖，可显著增强重组HpaA对幽门螺旋杆菌感染的保护作用。

技术领域

本发明涉及生物免疫技术领域，并且更具体地，涉及到一种可提高重组HpaA对幽门螺旋杆菌感染保护作用的脂肽，以及一种激发机体对幽门螺旋杆菌免疫应答的方法和制剂。

背景技术

幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是上消化道的主要致病菌，并已经被世界卫生组织列为胃癌发生的I类致病因子。H.pylori在我国成人的感染率为50％-80％，以每年1％-2％的速度递增，并且传统治疗方案的疗效不佳，因此预防H.pylori感染具有重要的临床意义。H.pylori在胃内定植的关键环节是黏附，HpaA是其主要黏附素之一。相关基因组学的研究表明，HpaA与其它蛋白质并无明显同源序列。因此，HpaA已成为H.pylori重组疫苗的热门候选抗原。

重组疫苗抗原具有纯度高、特异性高、安全性好等优点，但其免疫原性弱，只有与佐剂合用才能激起强烈而有效的免疫保护应答。已有研究表明，在大肠杆菌内重组表达的HpaA具有一定的抗原性和免疫原性，但激发人体免疫应答的效果并不十分理想，对抵抗H.pylori感染的保护作用也比较有限。

天然HpaA为脂蛋白，脂蛋白可以激动Toll2样受体(Toll-like receptor 2,TLR2)，从而启动细胞内信号传导，激活固有免疫反应以及建立适应性免疫反应。脂蛋白还具有很强的活化巨噬细胞和单核细胞的能力，促进细胞毒性T淋巴细胞(CTL)效应，可能促进机体的免疫应答，在一定程度上发挥佐剂作用。而重组HpaA末端缺乏了脂质化修饰可能是其免疫原性弱以及保护作用不理想的主要原因。

综上所述，寻求一种可以有效改善免疫原性弱以及保护作用不理想的物质或方法，成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明针对上述问题，目的在于提供一种可提高重组HpaA对幽门螺旋杆菌感染保护作用的脂肽，以及一种激发机体对幽门螺旋杆菌免疫应答的方法和制剂，其能解决现有技术的重组HpaA激发人体免疫应答的效果并不十分理想，对抵抗H.pylori感染的保护作用也比较有限的技术问题。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一方面，本发明公开了一种提高重组HpaA对幽门螺旋杆菌感染保护作用的脂肽，包括LP1或LP2；

所述LP1的结构式为：

所述LP2的结构式为：

其中，Peptide为肽段SPHIIETNEV。

进一步地，所述脂肽采用固相合成法反应得到。

进一步地，所述LP1合成路线为：

进一步地，所述LP2的合成路线为：

进一步地，所述脂肽在水溶液中可形成胶束。

另一方面，本发明还公开了一种激发机体对幽门螺旋杆菌免疫应答的方法，将上述的脂肽与重组HpaA混合后得到混合液，将所述混合液作用于机体。