[发明专利]柑橘褪绿矮缩病毒的实时荧光定量PCR检测试剂盒和检测方法在审
| 申请号： | 201811129552.7 | 申请日： | 2018-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN109182601A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 周彦;王瑛丽;杨真;王琴;刘莹洁 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙) 50211 | 代理人： | 邹晓艳 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;50 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 实时荧光定量PCR 检测试剂 总核酸 柑橘 检测 病毒 引物 特异性强 提取试剂 植株组织 常规PCR 窗口期 灵敏度 抽提 | ||
【权利要求书】：
1.一种柑橘褪绿矮缩病毒的实时荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，包括总核酸提取试剂，引物EL4-F4、EL4-R4，GoTaqqPCRMasterMix，所述引物序列为：
EL4-F4：5′-CTACAGGGACAGGTTTATTG-3′，
EL4-R4：5′-ACAGACCCACCGTCCTCA-3′。
2.一种柑橘褪绿矮缩病毒的实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取待测植株组织，抽提总核酸；
(2)以提取的总核酸为模板，利用权利要求1所述的检测试剂盒进行qPCR检测。
3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，qPCR的20μL反应体系包含：模板2μL、GoTaqqPCRMasterMix10μL、10μmol/L上下游引物各0.4μL，超纯水7.2μL。
4.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，qPCR扩增程序为：95℃预变性5min；95℃变性15s，退火30s，72℃延伸30s，40个循环；扩增后采集熔解曲线程序：95℃变性15s后，从60℃开始，每升高0.5℃停留30s采集荧光信号，直到温度升高到95℃融解曲线采集完成。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于西南大学，未经西南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811129552.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
