[发明专利]一种乳酸菌素plnE及其制备方法在审
| 申请号： | 201811126657.7 | 申请日： | 2018-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN109134628A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 樊倩;周盛昌;肖丽萍;王丽娜;肖俊峰;杨伟春;吴有林;傅心锋;周通 | 申请（专利权）人： | 福建傲农生物科技集团股份有限公司;漳州傲农牧业科技有限公司;广州傲农生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/335 | 分类号： | C07K14/335;C12N15/70 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 赵志远 |
| 地址： | 363000 福建省漳州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乳酸菌素 制备 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 断奶仔猪饲料 基因工程技术 大肠杆菌 氨基酸序列 巴氏杆菌 肠道健康 断奶仔猪 免疫功能 杀菌作用 体外重组 细菌 应用 | ||
1.一种乳酸菌素plnE，其特征在于，该乳酸菌素plnE的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述乳酸菌素plnE的分子量为6.2KDa。
2.根据权利要求1所述的一种乳酸菌素plnE，其特征在于，所述的乳酸菌素plnE等电点为11.7。
3.一种如权利要求1或2所述乳酸菌素plnE的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)合成plnE上游引物F和plnE下游引物R，其中，plnE上游引物F为5’-CGC
(2)以plnE上游引物F和plnE下游引物R为扩增引物，以乳酸菌DNA为模板，进行PCR扩增，PCR扩增产物用琼脂糖凝胶电泳鉴定；
(3)琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物后，切割目的条带进行纯化；将纯化后的plnE产物进行酶切、重组，并转化至BL21感受态细胞，即得所述乳酸菌素plnE。
4.根据权利要求3所述的一种乳酸菌素plnE的制备方法，其特征在于，所述的酶切将纯化后的plnE产物与质粒pET-32(+)进行双酶切，得到酶切的PCR目的片段和载体片段。
5.根据权利要求3所述的一种乳酸菌素plnE的制备方法，其特征在于，所述的重组是将酶切得到的PCR目的片段和载体片段进行连接反应。
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