[发明专利]一种切刻酶及其在基因组碱基替换中的应用有效
| 申请号: | 201811122909.9 | 申请日: | 2018-09-26 |
| 公开(公告)号: | CN109265562B | 公开(公告)日: | 2021-03-30 |
| 发明(设计)人: | 杨进孝;杨永星;吕欣欣;赵思;冯峰 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/82;C12N9/22 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;秦梦楠 |
| 地址: | 100097 北京市海淀区曙*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 切刻酶 及其 基因组 碱基 替换 中的 应用 | ||
1.融合蛋白,由切刻酶、胞嘧啶核苷脱氨酶PmCDA1和尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂UGI组成;所述融合蛋白中所述切刻酶、所述胞嘧啶核苷脱氨酶PmCDA1和所述尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂UGI自N端起依次排列;所述切刻酶如序列表的序列13自N端第1-1423位氨基酸所示。
2.权利要求1所述融合蛋白的编码基因。
3.一种碱基编辑系统,包括权利要求1所述的融合蛋白。
4.如权利要求3所述的碱基编辑系统,其特征在于:所述系统还包括sgRNA。
5.表达权利要求3或4所述的碱基编辑系统的重组表达载体、表达盒或重组菌。
6.一种用于基因组碱基替换的重组表达载体,包括表达盒甲和表达盒乙;所述表达盒甲表达权利要求1所述的融合蛋白;所述表达盒乙包括n个元件乙;所述元件乙包括sgRNA和靶序列;所述重组表达载体可靶向n个不同的靶序列进行碱基替换。
7.一种植物基因组碱基替换的方法,包括如下步骤:利用权利要求3或4所述的碱基编辑系统完成植物基因组碱基替换。
8.一种植物基因组碱基替换的方法,包括如下步骤:将权利要求6所述的重组表达载体导入目的植物,实现植物基因组碱基替换。
9.切刻酶,如序列表的序列13自N端第1-1423位氨基酸所示。
10.权利要求1所述的融合蛋白或权利要求3或4所述的碱基编辑系统或权利要求5所述的重组表达载体、表达盒或重组菌或权利要求6所述的重组表达载体或权利要求9所述的切刻酶在植物基因组碱基替换中的应用;所述碱基替换为将碱基C替换为T。
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