[发明专利]慢病毒载体冻干保存方法及制剂

权利要求书

1.一种制备慢病毒载体冻干制剂的方法，其特征在于，包括：将慢病毒载体与冻干保护剂混合，冷冻干燥；其中，所述的冻干保护剂包括：

海藻糖：5～30％(w/w)；

二价阳离子：0.1～80mM；和

氨基酸：0.02～5％(w/w)。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的慢病毒载体的滴度高于1×10⁶，较佳地高于5×10⁶，更佳地高于1×10⁷。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的冻干保护剂包括：

海藻糖：10～20％(w/w)；

二价阳离子：0.5～20mM；和

氨基酸：0.05～3％(w/w)。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的二价阳离子由CaCl₂和MgSO₄产生，且包括：

CaCl₂：0.2～3mM，较佳地0.4～2mM；

MgSO₄：0.15～2mM，较佳地0.3～1.5mM。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的氨基酸包括：L-丙氨酸、L-组氨酸、脯氨酸、色氨酸、谷氨酸钠、甘氨酸、赖氨酸盐酸盐、肌氨酸、L-酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸，或它们的组合。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的氨基酸选自：

(a)L-丙氨酸，以及选自L-组氨酸、脯氨酸、色氨酸、谷氨酸钠、甘氨酸、赖氨酸盐酸盐、肌氨酸、L-酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸的任一或多种；

(b)L-组氨酸、以及选自脯氨酸、色氨酸、谷氨酸钠、甘氨酸、赖氨酸盐酸盐、肌氨酸、L-酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸的任一或多种；

(c)L-丙氨酸；

(d)L-组氨酸；或

(e)L-丙氨酸以及L-组氨酸的组合。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，其中L-丙氨酸或L-组氨酸的用量为：

L-丙氨酸：0.03～2％(w/w)，较佳地为0.05～1.5％(w/w)；

L-组氨酸：0.06～4％(w/w)，较佳地为0.09～3％(w/w)。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，冷冻干燥的程序依次包括：-60±5℃预冻3±2小时；-35±5℃1500±500min，真空度1±0.2Pa；-20±2℃600±100min，真空度1±0.2Pa；0±2℃1800±500min，真空度1±0.2Pa。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的慢病毒载体为携带目的基因的载体。

10.一种慢病毒载体冻干制剂，其特征在于，所述的慢病毒载体冻干制剂包括：慢病毒载体以及冻干保护剂；其中，所述的冻干保护剂包括：

海藻糖：5～30％(w/w)；较佳地为10～20％(w/w)；

CaCl₂：0.2～3mM；较佳地为0.4～2mM；

MgSO₄：0.15～2mM；较佳地为0.3～1.5mM；和

氨基酸：0.02～5％(w/w)；较佳地为0.05～3％(w/w)。

11.如权利要求10所述的慢病毒载体冻干制剂，其特征在于，所述的慢病毒载体的滴度高于1×10⁶，较佳地高于5×10⁶，更佳地高于1×10⁷。