[发明专利]一种抽提拟南芥种子高质量RNA的方法

权利要求书

1.一种抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、将拟南芥种子在液氮中研磨成粉末并转移至第一离心管中；

S2、向所述第一离心管中加入RNA提取试剂，震荡获得匀浆液；

S3、将所述匀浆液在室温下孵育，而后离心，获得上清液；

S4、在所述上清液中加入氯仿和浓度5mol/L的NaCl，充分混匀后再离心，获得上层水相；

S5、将所述水相转移至一离心柱中并用RNeasy Mini Kit进行纯化，得到RNA样品。

2.如权利要求1所述的抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于：步骤S1中进行研磨时，边研磨边不断地加入液氮。

3.如权利要求1所述的抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于：步骤S2中所用的RNA提取试剂为PureLink Plant RNAReagent，用量为拟南芥种子粉末的1～5倍体积。

4.如权利要求1所述的抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于：步骤S1中拟南芥种子的粉末用量为0.1～0.4mL。

5.如权利要求1所述的抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于：步骤S3中孵育的时间为5～10min。

6.如权利要求1所述的抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于：步骤S3中离心是在室温下进行，转速12000g，离心5min，获得的所述上清液转移至第二离心管中。

7.如权利要求6所述的抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于：步骤S4中，加入的NaCl和氯仿的体积分别为所述上清液体积的1/5、3/5。

8.如权利要求7所述的抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于：步骤S4中离心是在室温下进行，转速12000g，离心5min。

9.如权利要求1所述的抽提拟南芥种子高质量RNA的方法，其特征在于，步骤S5具体包括：

S51、吸取所述水相并转移至第三离心管中，向所述第三离心管中加入纯乙醇，摇匀得到混合液；

S52、将所述混合液吸取至RNeasy Mini Kit试剂盒的离心柱中，并在12000g转速下离心30秒，舍去离心液；

S53、向所述离心柱中加入缓冲液RPE，再在12000g转速下离心30秒，舍去离心液；

S54、重复步骤S53一次，而后继续在12000g转速下离心2min；

S55、将所述离心柱转移至第四离心管中，并在离心柱中心膜位置加入加热的无RNA酶水，静置2min，12000g再次离心2min，获得RNA样品。