[发明专利]一种L-α-甘油磷酰胆碱异构体的检测方法

说明书

本申请公开了一种L‑α‑甘油磷酰胆碱异构体的检测方法，所述方法包括：提供样品分析溶液；将样品分析溶液注入高效液相色谱仪进行色谱分析，并记录色谱图；其中色谱柱为正相色谱柱，流动相为烷烃与醇的混合液。通过上述方式，本申请能够提高检测分离度和准确度。

技术领域

本申请涉及药物分析技术领域，特别是涉及一种L-α-甘油磷酰胆碱异构体的高效液相检测方法。

背景技术

L-α-甘油磷酰胆碱(Choline Alfoscerate，GPC)是一种胆碱类药物。目前已被FDA批准治疗脑缺血型中风、阿尔兹海默氏症、多发性脑梗死型痴呆等。也可作为食品、化妆品、药用辅料的添加剂，通过磷脂酶A作用可转化为溶血卵磷脂，用于防治动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱及营养不良症。其作用机制被认为包含游离胆碱的释放，自由胆碱可以在大脑被用于合成乙酰胆碱和磷脂酰胆碱。L-α-甘油磷酰胆碱的化学结构式为：

由上述结构式可知，L-α-甘油磷酰胆碱具有一个手性中心，理论上会产生一个对映异构体L-β-甘油磷酰胆碱，L-β-甘油磷酰胆碱的结构式为

本申请的发明人在长期的研发过程中，发现过往对其手性的控制是通过控制产品的比旋度来实现的，然而旋光度测定的误差大、准确度低，且标准是一个很宽的范围，无法反映L-α-甘油磷酰胆碱中异构体的准确量，也无法指导L-α-甘油磷酰胆碱的异构体纯化工作。因此，亟需一种科学、有效的分析方法对其进行准确的定量研究。

发明内容

本申请主要解决的技术问题是提供一种L-α-甘油磷酰胆碱异构体的检测方法，能够提高检测分离度和准确度。

为解决上述技术问题，本申请采用的一个技术方案是：提供一种L-α-甘油磷酰胆碱异构体的检测方法，所述方法包括：提供样品分析溶液；将样品分析溶液注入高效液相色谱仪进行色谱分析，并记录色谱图；其中色谱柱为正相色谱柱，流动相为烷烃与醇的混合液。

其中，色谱柱为硅胶表面涂敷型正相色谱柱，正相色谱柱填料的涂敷材料为纤维素-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)、纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三乙酸酯、纤维素-三苯甲酸酯、纤维素-三(苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(4-氯苯基氨基甲酸酯)、纤维素-三(4-甲基苯基氨基甲酸酯)或纤维素-三肉桂酸酯中的一种。

其中，流动相中醇的体积比为10％～90％；流动相的pH值为1.0～9.0。

其中，烷烃为正己烷、正庚烷或异己烷；醇为甲醇、乙醇或甲醇-乙醇混合液。

其中，流动相为烷烃-甲醇-乙醇混合液，烷烃-甲醇-乙醇的混合比例为50～70％：25～45％：1～10％。

其中，检测方法的检测器为蒸发光散射检测器或示差折光检测器。

其中，蒸发光散射检测器漂移管温度为50℃～120℃，气流速为1.5L/min～3.0L/min；示差折光检测器检测池温度为20℃～50℃，采集频率为2Hz～20Hz。

其中，利用等度洗脱的方式进行洗脱；所述流动相的流速为0.5～1.5ml/min；所述色谱柱的柱温为20～50℃；运行时间为5～50min。

其中，利用甲醇、乙醇、甲醇-烷烃混合液、乙醇-烷烃混合液、甲醇-乙醇-烷烃混合液对样品进行溶解，制得样品分析溶液。

其中，样品为甘油磷酰胆碱原料药、甘油磷酰胆碱中间体或甘油磷酰胆碱制剂。

其中，色谱柱的柱长为100mm～300mm，内径为1mm～10mm，粒径为1μm～10μm。

本申请的有益效果是：区别于现有技术的情况，本申请提供一种L-α-甘油磷酰胆碱异构体的检测方法，利用色谱仪进行检测分析，误差小，准确度高，且色谱仪的色谱柱为正相色谱柱，分离度更好。