[发明专利]Peroxiredoxin 4蛋白增强体外培养卵母细胞抗氧化作用的用途

说明书

本发明提供了一种Peroxiredoxin 4蛋白增强体外培养卵母细胞抗氧化作用的用途。本发明能够从提高颗粒细胞抵御氧化应激能力的角度、以及卵母细胞抗氧化的作用，来改善体外培养未成熟卵母细胞的成熟率，也能够通过细胞内抗氧化应激机制延缓卵母细胞老化，提高辅助生殖过程中卵母细胞受精率和临床妊娠率。

技术领域

本发明属于辅助生殖、胚胎培养领域。具体的说是涉及Peroxiredoxin 4蛋白增强体外培养卵母细胞抗氧化作用的用途。

背景技术

随着年龄增长、病理条件下内环境的改变而导致的氧化应激/ROS损伤都将影响卵泡的发育。这是由于在病理状态下，颗粒细胞的氧化应激可导致细胞发生凋亡,影响颗粒细胞的保护及调节功能,从而影响卵子的发育。另一方面，辅助生殖治疗中的体内或体外已然成熟的卵子，在授精之前进行体外培养的过程中，由于氧化应激反应使其老化从而影响卵母细胞质量、影响授精能力和胚胎发育潜能，降低临床妊娠率。

近些年来，胚胎移植技术已在动物引种和改良方面广泛应用，已成为体外受精、嵌合体、转基因和克隆动物实现的应用技术。在体外受精、转基因、克隆以及试管婴儿等胚胎生物技术中，经常会涉及到未成熟卵体外培养成熟（IVM），不同的未成熟卵培养液及培养方法会影响未成熟卵体外培养的成熟率、受精率及临床妊娠率。因此，如何提高未成熟卵体外培养成熟率一直是胚胎培养领域的关注焦点。

现有未成熟卵体外培养成熟技术中，大部分技术焦点在于如何提高未成熟卵母细胞自身成熟率，在基础培养液中添加激素类、血清类及生长因子类(EGF)等。但是，目前还没有通过改善卵丘细胞-卵母细胞复合体（COC）颗粒细胞的氧化应激从而提高未成熟卵体外发育成熟的方法。

目前普遍认为卵泡内产生的活性氧（ROS）和氧自由基，例如OH、O₂以及H₂O₂，特别是排卵过程中产生的活性氧，不利于卵母细胞发育的。调节卵泡中活性氧和抗氧化剂之间的平衡，对于卵母细胞发育成熟和颗粒细胞功能起着关键作用。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提出一种Peroxiredoxin 4蛋白增强体外培养卵母细胞抗氧化作用的用途。进一步的，提出一种Peroxiredoxin4蛋白在调节体外培养卵母细胞中活性氧和抗氧化之间平衡的用途。

进一步的，提出一种Peroxiredoxin 4蛋白在抵御颗粒细胞氧化应激导致的细胞凋亡发挥调节作用的用途，进一步的，Peroxiredoxin 4蛋白通过颗粒细胞内及卵母细胞自身的抗氧化应激机制发挥改善未成熟卵母细胞体外培养成熟的用途。

进一步的，提出一种Peroxiredoxin 4蛋白在抑制H₂O₂导致的卵丘扩展指数及卵母细胞 MII 成熟率下降的用途；以及，Peroxiredoxin 4蛋白在抑制ROS导致的卵丘扩展指数及卵母细胞 MII 成熟率下降的用途。

进一步的，提出一种Peroxiredoxin 4蛋白通过细胞内抗氧化应激机制延缓卵母细胞老化的用途，具体的，提出一种Peroxiredoxin4蛋白通过颗粒细胞内及卵母细胞自身的抗氧化应激机制延缓卵母细胞老化的用途。

进一步的，本发明还提出一种制备控制卵泡中活性氧和抗氧化剂之间平衡的试剂，该试剂中含有Peroxiredoxin 4蛋白，还含有体外培养试剂上内允许添加的辅料。。所述试剂为卵母细胞培养液和体外未成熟卵培养液，还包含CZB培养液、KSOM培养液、MEM培养液、HTF培养液中的任何一种培养液，是作为基础培养基。以上所述基础培养基皆为本领域技术人员悉知的商品化培养试剂。