[发明专利]一种兼具定性与定量评价的三勒浆口服液质量检测方法

说明书

本发明公开了三勒浆口服液的HPLC指纹图谱检测方法。本发明的指纹图谱出峰多，分离度好，重复性好，精密度高，为全面监控三勒浆口服液的质量提供了有效保障。利用本发明指纹图谱检测方法的提取方法和色谱条件，还可以测得三勒浆口服液中5种活性成分没食子酸、没食子儿茶素、表儿茶素、柯里拉京和鞣花酸的含量，实现了对三勒浆口服液定性和定量的双重研究。

技术领域

本发明涉及三勒浆口服液的HPLC指纹图谱检测方法，属于药物质量控制方法技术领域。

背景技术

三勒浆处方源于藏药名方三果汤(又称哲布松汤)，由诃子Terminalia chebulaRetz、毛诃子Terminalia billerica Roxb和余甘子Phyllanthus emblica L三种药物配伍而成，因三味药物在藏药中分别被称为蓭摩勒、诃梨勒与毗梨勒，又称为三勒浆。在传统藏医学中，三果汤对瘟疫、高原红细胞增多症具有显著疗效^[1]，被视为滋补强壮药；在现代医学中，发现其具有很好的免疫调节功能，对高脂血症^[2]、肿瘤^[3]等都具有一定的治疗效果。上世纪90年代，以余甘子和诃子为原料，添加L-精氨酸、L-天门冬氨酸、蜂蜜等辅料，开发了具有抗疲劳、免疫调节和耐缺氧功能的三勒浆口服液，尤其作为学生群体参加重大考试的保健品而深受欢迎。

三勒浆口服液富含多酚，但对其化学成分研究较少，质量控制也仅以柯里拉京作为内控指标，难以全面控制其质量。

发明内容

本发明的目的在于提供三勒浆口服液的HPLC指纹图谱检测方法。

该方法是采用HPLC指纹图谱进行检测，其操作步骤如下：

(1)供试品溶液的制备：取三勒浆口服液，加入50％甲醇水溶液提取，制备供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：取没食子酸、没食子儿茶素、表儿茶素、柯里拉京和鞣花酸对照品，制备对照品溶液；

(3)对照药材溶液的制备：取诃子、余甘子药材粉末，加水回流提取后，制备对照药材溶液；

(4)对照指纹图谱的建立：

分别取对照品溶液、供试品溶液和诃子、余甘子对照药材溶液，注入高效液相色谱仪检测，得到各批次药材和参照物的色谱数据，色谱条件如下：

色谱柱以以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长为260～280nm，流动相为0.1％磷酸水(A)-甲醇(B)，进行梯度洗脱，洗脱条件为：

对色谱数据进行处理，建立三勒浆口服液的对照指纹图谱。

进一步地，检测波长为270nm。

进一步地，色谱柱为Welchrom C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；柱温为25℃。

进一步地，流速为1mL/min。

进一步地，步骤(1)中制备供试品溶液的具体操作步骤如下：

精密量取三勒浆5mL至25mL容量瓶，加入50％甲醇水至刻度线，摇匀，用0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液作为供试品溶液。

进一步地，步骤(2)中，以50％甲醇水溶液为溶剂，制备混合对照品溶液。

进一步地，步骤(3)中制备对照药材溶液的具体操作步骤如下：

称取诃子、余甘子粉末(过2号筛)各5g，分别置1000mL圆底烧瓶内，加入200mL水，加热回流提取1h，过滤，滤液定容至500mL，用0.22μm微孔滤膜过滤，取滤液，即得。

进一步地，所述对照指纹图谱如图1中的A所示。