[发明专利]一种超高效液相色谱-串联质谱检测烟用接装纸中5种甜味剂的方法

权利要求书

1.一种超高效液相色谱-串联质谱检测烟用接装纸中5种甜味剂的方法，所述5种甜味素分别为甜蜜素、糖精钠、阿巴斯甜、安赛蜜和纽甜，其特征在于：具体包括以下步骤：

a、将试样进行裁剪，烟用接装纸的裁剪方式按照YC 171-2008的规定进行，即准确裁切长200 mm，宽40 mm的且包含一个单边的接装纸样品；将样品剪成5 mm×5 mm左右的碎片，混合均匀； 称取0.5 g样品，并置于50 mL具塞三角瓶中；

b、样品的提取：准确加入20 mL 萃取液：超纯水，浸泡10min,，然后超声萃取30 min；

c、样品净化：静置5 min, 吸取2mL上清液，经0.22μm水相滤膜过滤；

d、移取100μL的滤液，用超纯水将样品稀释至1.0 mL，作为样品待测液进UPLC-MS/MS分析；

e、准备混合标准工作溶液：称取各甜味剂标准品用超纯水定容，配制具有浓度梯度的混合标准工作溶液；

f、液相色谱-串联质谱测定:吸取配制好的不同浓度的混合标准工作溶液以及样品待测液，分别注入超高效液相色谱-串联质谱仪；

采用的液相色谱条件为：色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18，规格100 mm×2.1 mm,1.7 μm；流动相A：甲醇，B：0.1 %甲酸水溶液，流速：200 μL/min，梯度洗脱；柱温：40 ℃；进样量：2μL；梯度洗脱程序如下表：

采用的质谱条件：扫描方式：负离子扫描; 电喷雾离子源(ESI); 离子源温度：150 ℃；毛细管电压：-3.0 KV；锥孔气气流量：50L/hour；脱溶剂气流量为650L/hour; 脱溶剂气温度：350℃; 停留时间：100 ms；检测方式：多离子反应监测（MRM）；

g、甜味剂测定结果的计算

以外标法进行定量分析，即以甜味剂标准品的定量离子对峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.995；对提取后的样品待测液进行测定，得出甜味剂的定量离子对峰面积，代入标准曲线求得样品中甜味剂的残留量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：混合标准工作溶液的配制方式如下：分别准确称取5种甜味剂各10 mg于同一个100 mL容量瓶中，精确至0.1 mg，用超纯水溶解并定容，配制成浓度为100μg/mL混合标准储备溶液；移取1000μL 混合标准储备溶液到10 mL容量瓶中，用超纯水定容，此混合标准溶液浓度为10.0 μg/mL；分别移取一定体积0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mL的混合标准溶液于10 mL容量瓶中，用超纯水稀释定容，即配制成不同浓度的混合标准工作溶液，系列混合标准工作溶液中各种甜味剂的浓度均分别为：200 ng/mL，500 ng/mL，1000 ng/mL，2000 ng/mL和5000 ng/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤f中，所述MRM参数见下表：

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