[发明专利]蜂王浆中多菌灵类成分的检测方法

说明书

本发明公开了一种蜂王浆中多菌灵类成分的检测方法，涉及蜂王浆检测技术领域，其技术方案要点是包括以下步骤：（1）标准溶液的配制；（2）蜂王浆前处理：称取2g蜂王浆，放置在离心管中，加入0.1ml吡虫啉D4内标工作液和0.1ml多菌灵D3内标工作液，旋涡混匀，再加入质量浓度为30%的乙醇涡旋使溶液充分溶解，再加入PH值为7.5‑8的甘氨酸‑盐酸缓冲液15ml，旋涡振荡1min，超声波处理15min；（3）蜂王浆后处理；（4）色谱检测；（5）质谱检测。本发明解决了不能同时检测多菌灵、甲基托布津和乙基托布津的问题，利用PH值为7.5‑8的甘氨酸‑盐酸缓冲液，能够同时检测三种物质，且方法简单、快速、灵敏。

技术领域

本发明涉及蜂王浆检测技术领域，更具体的说，它涉及一种蜂王浆中多菌灵类成分的检测方法。

背景技术

蜂王浆是工蜂食用花粉后分泌的一种乳状物，蜂王浆中富含多中人体所需的营养成分，如氨基酸、维生素、微量元素和矿物质等，具有降低胆固醇、防衰老、保护肝脏、降血脂、增强免疫力、促进组织再生等功能。

花源植物由于易感染病虫害，常会被喷洒各种农药，现农药中使用较多的是多菌灵杀菌剂，多菌灵是高效低毒内吸性杀菌剂，有内吸治疗和保护作用，它的作用机理是干扰花源植物中病原菌在有丝分裂过程中纺锤体的形成，进而影响病原菌的细胞分裂，起到杀死病菌的作用；与多菌灵作用机理相同的一类杀菌剂有甲基托布津和乙基托布津；工蜂在食用喷洒过农药的花粉后，在分泌蜂王浆时，农药中某些成分会残留在蜂王浆内，若蜂王浆中农药成分过量，会对人体造成不利影响，因此需要对蜂王浆内多菌灵、甲基托布津和乙基托布津进行检测。

现有标准GBT20769《水果和蔬菜中450中农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法》中用液相色谱-串联质谱法测定蜂王浆中多菌灵，但并没有记载甲基托布津和乙基托布津的检测方法；现有标准GB/T30771-2008《蜂蜜中486种农药及相关化学拼残留量的测定液相色谱-串联质谱法》中有蜂王浆中多菌灵和甲基托布津的检测方法，但没有乙基托布津的检测方法，且液相色谱-串联质谱法需要使用有机溶剂在分液漏斗中液液萃取2次，浓缩2次，再固液萃取2次，操作较为繁琐。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种蜂王浆中多菌灵类成分的检测方法，其通过用弱碱性甘氨酸-盐酸缓冲液对蜂王浆进行前处理，能够同时检测多菌灵、甲基托布津和乙基托布津且方法简单、快速、灵敏。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：一种蜂王浆中多菌灵类成分的检测方法，包括以下步骤：

(1)标准溶液的配制：

1.1标准储备液：分别称取多菌灵、甲基托布津和乙基托布津，均用乙腈作溶剂定容在100mL的容量瓶中，配制成质量溶度为100mg/L的标准储备液，然后放在4℃下避光保存；

1.2标准工作液：分别量取所述多菌灵标准储备液、甲基托布津标准储备液和乙基托布津标准储备液，并将三种标准储备液混合均匀，再用乙腈进行稀释，配制成1mg/L和0.1mg/L的混合标准溶液，然后放在4℃下避光保存；

1.3内标储备液：分别称取一定量的内标多菌灵D3和内标吡虫啉D4，用适量甲醇作溶剂，并定容在100mL的容量瓶中，配制成质量浓度为100mg/L的内标储备液，然后放在4℃下避光保存；

1.4内标工作液：分别量取一定量的多菌灵D3内标储备液和吡虫啉D4内标储备液，用甲醇定容，将多菌灵D3内标储备液的质量浓度配制成100ng/L，制成多菌灵D3内标工作液，将吡虫啉D4内标储备液的质量浓度配制成100ng/L，制成吡虫啉D4内标工作液；