[发明专利]用于鉴别H5和H7高致病变异型禽流感病毒的冻干微芯片、试剂盒及方法

说明书

本发明“用于鉴别H5和H7亚型HA裂解位点插入变异型高致病性禽流感病毒的冻干微芯片、试剂盒及方法”，属于分子检测领域。所述冻干微芯片的特征是：荧光PCR反应体系通过冻干被固定在所述微芯片上；所述荧光PCR反应体系包括：H5亚型HA裂解位点插入变异型高致病性禽流感病毒上下游引物及Taqman探针；H7亚型HA裂解位点插入变异型高致病性禽流感病毒上下游引物及Taqman探针。本发明同时检测H5亚型HA裂解位点插入变异型高致病性禽流感病毒和H7亚型HA裂解位点插入变异型高致病性禽流感病毒，所述检测试剂盒检测方法准确性、特异性和敏感性高，检测时间短。

技术领域

本发明涉及病毒的分子生物学检测技术领域，特别是涉及一种用于鉴别H5和H7亚型 HA裂解位点插入变异型高致病性禽流感病毒的冻干微芯片、试剂盒及方法。

背景技术

高致病性禽流感(Highly pathogenic avian influenza,HPAI)是由H5或H7亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起多种禽类发生急性感染和高度死亡的一种烈性传染病，被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告的动物疫病，在我国被列为一类动物疫病。在国务院发布的《国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020年)》中，将其列为优先防治和重点防范的动物疫病。

禽流感病毒呈多形性，其中球形直径80～120nm，有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素(H)/和神经氨酸酶(N)蛋白抗原性的不同，目前可分为17个H亚型(H1～ H17)和9个N亚型(N1～N9)。感染人的禽流感病毒亚型主要为H5N1、H9N2、H7N7、H7N9、H10N8等。禽流感病毒可分为高致病性禽流感病毒、低致病性禽流感病毒和无致病性禽流感病毒。高致病性禽流感病毒目前只发现H5和H7两种亚型。这两种亚型可引起禽类重症流感的暴发流行，对禽类具有高度的致病力。高致病性禽流感不仅严重危害我国及世界养禽业发展，每年造成巨大的经济损失，而且对社会公共卫生安全和人类健康造成巨大威胁。在我国， H5N1亚型禽流感于1996年在广东首次报道后，每年均引起数起疫情，直接和间接经济损失巨大。该亚型病毒于1997年在香港首次直接感染人并发生致人死亡事件，公共卫生学意义重大。流行病学监测结果表明，近年来，2.3.4.4分支的H5N6亚型高致病性禽流感病毒在我国已成为优势流行毒株，分离率高，造成多起严重疫情，危害较大。2013年，我国首次报道 H7N9亚型禽流感病毒感染人和致人死亡，引起广泛社会关注。在已发生的5波疫情中，该亚型病毒已造成数百人死亡，迄今仍不时有新增病例报道。H7N9亚型禽流感病毒经不断变异，演化为高致病性毒株，于2017年3月在湖南永州首次引起高致病性禽流感疫情。