[发明专利]一种天蓝色链霉菌双向启动子SCP1在审

专利信息
申请号: 201811050746.8 申请日: 2018-09-10
公开(公告)号: CN109295056A 公开(公告)日: 2019-02-01
发明(设计)人: 财音青格乐;乔建军;李莉芬 申请(专利权)人: 天津大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/63
代理公司: 天津一同创新知识产权代理事务所(普通合伙) 12231 代理人: 陆艺
地址: 300350 天津市津南区海*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 双向启动子 天蓝色链霉菌 核苷酸序列 目的基因 基因表达载体 起始密码子 启动子序列 终止密码子 表达效率 多启动子 高效表达 启动子 构建 质粒 修饰 蛋白 翻译 基因 保证
【权利要求书】:

1.一种天蓝色链霉菌双向启动子SCP1,所述双向启动子SCP1的核苷酸序列是用SEQ IDNO.1所示;或与所述SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列互补的核苷酸序列。

2.含有权利要求1所述的一种天蓝色链霉菌双向启动子SCP1的重组载体,其特征是用下述方法构建:

(1)用细菌基因组DNA提取试剂盒提取天蓝色链霉菌M145基因组;

(2)以基因组DNA为模板,以SCP1-F,SCP1-R为引物进行PCR扩增,所述SCP1-F的核苷酸序列用SEQ ID NO.2所示,所述SCP1-R的核苷酸序列用SEQ ID NO.3所示;

(3)PCR产物经质量体积比为1.5%的琼脂糖凝胶检测,用凝胶回收试剂盒回收目的片段双向启动子SCP1,所述目的片段双向启动子SCP1的核苷酸序列用SEQ ID NO.1所示;

(4)在所述双向启动子SCP1的两侧用融合PCR的方法连接上目的基因,得到融合片段,将所述融合片段连接在质粒上,得到含有一种天蓝色链霉菌双向启动子SCP1的重组载体。

3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征是所述目的基因为绿色荧光蛋白基因eGFP,所述绿色荧光蛋白基因eGFP的核苷酸序列用SEQ ID NO.4所示。

4.根据权利要求2所述的重组载体,其特征是所述质粒为pACYCDuet-1。

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