[发明专利]一种关节软骨玻璃化冷冻保护液及制备方法

权利要求书

1.一种关节软骨玻璃化冷冻保护液，其特征在于，所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液包括以下重量份数的组分：二甲基亚砜200-300份、角鲨烯25-60份、分心木多糖20-35份、四氢澳洲茄胺12-25份、虾青素2-7份、水10-30份；

所述的分心木多糖的制备方法为：用质量分数为3-4％的氢氧化钠溶液提取分心木，得到的提取液中加入胃蛋白酶进行酶解，然后用三氯乙酸去除蛋白，所得物再用质量分数为70-75%的乙醇进行重结晶，即得分心木多糖。

2.根据权利要求1所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液，其特征在于，所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液包括以下重量份数的组分：二甲基亚砜230-270份、角鲨烯35-50份、分心木多糖25-32份、四氢澳洲茄胺15-22份、虾青素3-5份、水14-26份。

3.根据权利要求1所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液，其特征在于，所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液包括以下重量份数的组分：二甲基亚砜250份、角鲨烯42份、分心木多糖28份、四氢澳洲茄胺18份、虾青素4份、水22份。

4.一种根据权利要求1-3任一所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）取分心木多糖、角鲨烯和二甲基亚砜混合，超声震荡处理5-10min后，混合物置于75-85℃下搅拌反应4-6h，搅拌速度为400-600r/min；

（2）将上步所得物置于0-5℃下静置20-30h；然后与四氢澳洲茄胺、虾青素混合，置于85-95℃下搅拌反应20-35min，搅拌速度为800-1000r/min；

（3）上步所得物先采用Co60-γ辐射源进行辐射处理，辐照剂量为20-30GY；再进行紫外线照射处理，照射强度为50-100µW/cm；

（4）将上步所得物与水混合均匀后，置于-50℃至-10℃下冷冻10-20h，再置于室温下静置1-5h，即得关节软骨玻璃化冷冻保护液。

5.根据权利要求4所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液的制备方法，其特征在于，步骤（1）取分心木多糖、角鲨烯和二甲基亚砜混合，超声震荡处理7min后，混合物置于78℃下搅拌反应5h，搅拌速度为500r/min。

6.根据权利要求4所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液的制备方法，其特征在于，步骤（2）将上步所得物置于2℃下静置26h；然后与四氢澳洲茄胺、虾青素混合，置于90℃下搅拌反应25min，搅拌速度为900r/min。

7.根据权利要求4所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液的制备方法，其特征在于，步骤（3）上步所得物先采用Co60-γ辐射源进行辐射处理，辐照剂量为25GY；再进行紫外线照射处理，照射强度为80µW/cm。

8.根据权利要求4所述的关节软骨玻璃化冷冻保护液的制备方法，其特征在于，步骤（4）将上步所得物与水混合均匀后，置于-25℃下冷冻12h，再置于室温下静置3h，即得关节软骨玻璃化冷冻保护液。