[发明专利]一种整合型酵母重组表达系统及使用方法在审
| 申请号： | 201811048701.7 | 申请日： | 2018-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN109266564A | 公开（公告）日： | 2019-01-25 |
| 发明（设计）人： | 华权高;沈鹤霄;李昆鹏;邓文鹏;田甜甜;杜丽娜 | 申请（专利权）人： | 武汉金开瑞生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12R1/865;C12R1/85 |
| 代理公司： | 北京众达德权知识产权代理有限公司 11570 | 代理人： | 王俊杰 |
| 地址： | 430206 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 整合 酵母 传代 重组表达系统 高密度发酵 遗传 整合型 基因缺陷型 酵母基因组 培养基成本 表达系统 酵母表达 酵母菌株 酵母整合 筛选标记 稳定遗传 质粒丢失 缺陷型 构建 位点 验证 转换 转化 改造 | ||
1.一种整合型酵母，其特征在于，所述酵母为URA3基因缺陷型，并含表达URA3基因且整合到酵母基因组的载体。
2.如权利要求1所述的酵母，其特征在于，所述载体为整合型质粒载体。
3.如权利要求2所述的酵母，其特征在于，所述整合型质粒载体为表达URA3基因的载体。
4.如权利要求3所述的酵母，其特征在于，所述整合型质粒载体为pYIP5。
5.如权利要求1所述的酵母，其特征在于，所述URA3基因缺陷可以是URA3基因全长或部分的缺失或敲除。
6.如权利要求5所述的酵母，其特征在于，所述缺失或敲除通过同源置换实现。
7.如权利要求1所述的酵母，其特征在于，所述酵母为酿酒酵母或贝酵母。
8.如权利要求1所述的酵母，其特征在于，所述酵母含有能够稳定遗传的外源基因。
9.如权利要求8所述的酵母，其特征在于，所述外源基因为PGC3。
10.如权利要求1-9所述的酵母，其特征在于，其外源基因在300代能稳定遗传。
11.一种酵母表达系统，其包含如权利要求1-9所述的酵母。
12.构建如权利要求1-10所述的酵母或如权利要求11所述酵母表达系统的方法，其特征在于，构建URA3基因缺陷型酵母，将含有URA3基因及外源基因的载体线性化后整合至酵母基因组。
13.稳定表达外源基因的方法，其特征在于，使用如权利要求1-10所述的酵母或如权利要求11所述的酵母表达系统。
14.如权利要求13所述的方法，所述外源基因在300代能稳定遗传。
15.权利要求1-10所述的酵母或权利要求11所述的酵母表达系统在稳定表达外源基因中的用途。
16.权利要求1-10所述的酵母或权利要求11所述的酵母表达系统在高密度发酵中的用途。
17.权利要求1-10所述的酵母或权利要求11所述的酵母表达系统在酿酒中的用途。
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