[发明专利]抗登革病毒DE3的纳米抗体、制备方法及用途

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，提供了一种抗登革病毒DE3的纳米抗体、制备方法及应用，该抗登革病毒DE3的纳米抗体为VHH抗体，具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，编码该纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，通过亲和力分析本发明的纳米抗体具有良好的亲和力，通过体外病毒中和试验，本发明的纳米抗体具有登革4型病毒特异中和活性，并且病毒的中和活性具有浓度依赖关系，说明本发明的纳米抗体具有潜在的的抗登革病毒的作用，对登革热流行或爆发具有优良的预防或治疗作用，具备广阔的临床应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种抗登革病毒DE3的纳米抗体、其制备方法和用途，尤其是在制备登革热疫苗以及在治疗或预防登革病毒流行或爆发方面的用途。

背景技术

随着“加快建设海洋强国”国家政策的逐步推进，我国海军承担维和护航、远洋保障、联合演习等的军事任务日益增加。存在于热带亚热带地区的有毒有害的蚊虫蚁兽是海军战士面临的常见威胁，极易造成部队战斗力的下滑和经济的损失。因此针对热带疾病的防治研究工作对于渡海登陆作战的卫勤保障和医疗工作有重大意义，尽快着手开展治疗热带疾病的科学应用研究是十分必要的。

登革热是分布最广、发病人数最多的虫媒病毒病之一，主要流行于热带和亚热带地区，范围覆盖100多个国家和地区(李玉华.登革病毒及登革热疫苗研究进展[J].国际生物制品学杂志,2012,35(6):292-297)。登革病毒是属于黄病毒科黄病毒属，可导致感染者罹患登革热，严重者发展为登革出血热和登革休克综合征，危及生命(Guzman M G,AlvarezM,Halstead S B.Secondary infection as arisk factor for dengue hemorrhagicfever/dengue shock syndrome:an historical perspective androle ofantibody-dependent enhancement ofinfection[J].Archives ofVirology,2013,158(7):1445-1459)。近十几年来，登革热作为一种重要的病毒性疾病，对包括美洲在内的热带和亚热带地区的公共卫生构成了巨大的威胁，并且有加剧的趋势，其主要媒介是埃及伊蚊。(AzevedoA S,A J,Archer M,et al.The synergistic effect ofcombinedimmunization with a DNA vaccine and chimeric yellow fever/dengue virus leadsto strong protection against dengue[J].Plos One,2013,8(3):e58357)。目前我国海军部队执行海外维和、保障援助的任务日益增加，海军官兵在热带地区易面临登革病毒感染的风险，对这些地区的海洋作业及军事训练构成一定的威胁。

目前，初次感染登革病毒伴发的登革热一般无特殊治疗，适当休息并进行必要的对症处理即可。然而针对于再次感染登革病毒而引起严重登革出血热和登革休克综合征的患者的主要是实施支持疗法，一般进行快速的血容量补充，纠正休克症状等，帮助患者度过急性期(杨思齐.登革热与登革出血热的治疗[J].人民军医,1995(4):18-19)。由于登革病毒血清型多、致病机制复杂，导致登革热疫苗的研制存在许多困难(Sridhar S,Luedtke A,Langevin E,et al.Effect ofDengue Serostatus on Dengue Vaccine Safety andEfficacy.[J].New England Journal ofMedicine,2018)。目前无治疗重症登革的特效方案，登革热现已成为一个严重的公共卫生问题。