[发明专利]抗登革病毒DE3的纳米抗体、制备方法及用途有效
| 申请号： | 201811036758.5 | 申请日： | 2018-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN109320607B | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 胡适;崔瀛书;李天;雷长海;傅文燕 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C07K16/10 | 分类号： | C07K16/10;C12N15/13;C12N15/63;A61K39/42;A61P31/14 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 赵青 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗登革 病毒 de3 纳米 抗体 制备 方法 用途 | ||
1.一种抗登革病毒DE3的纳米抗体，其特征在于，所述纳米抗体为VHH抗体，具有SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列。
2.编码权利要求1所述的抗登革病毒DE3的纳米抗体的核苷酸，其特征在于，所述核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.权利要求1所述的抗登革病毒DE3的纳米抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（A）全基因合成抗登革病毒DE3的纳米抗体VHH片段；
（B）采用PCR技术对步骤（A）中获得的抗登革病毒DE3的纳米抗体VHH片段进行克隆，PCR产物经琼脂糖凝胶电泳纯化回收并克隆到表达载体中，测序验证后确认获得正确的克隆；
（C）将上述表达载体引入宿主细胞内进行融合蛋白的表达。
4.根据权利要求3所述的抗登革病毒DE3的纳米抗体的制备方法，其特征在于：
其中，在步骤（B）中，PCR所采用的引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
5.根据权利要求3所述的抗登革病毒DE3的纳米抗体的制备方法，其特征在于：
其中，所述表达载体为pGEM-T、Pet32a，pcDNA3.1、pEE6.4或pEE12.4，所述表达载体中包括连接有合适的转录和翻译调节序列的融合DNA序列，
所述宿主细胞为哺乳动物细胞、细菌细胞、昆虫细胞或真菌细胞。
6.含有权利要求1所述的抗登革病毒DE3的纳米抗体的药物组合物，其特征在于，还包括药学上可接受的药物载体。
7.根据权利要求6所述的抗登革病毒DE3的纳米抗体的药物组合物，其特征在于：
其中，所述药物组合物为水针或冻干制剂，
所述药学上可接受的药物载体包括表面活性剂、溶液稳定剂、等渗调节剂和缓冲液之一或组合。
8.根据权利要求7所述的抗登革病毒DE3的纳米抗体的药物组合物，其特征在于：
其中，所述水针或冻干制剂静脉注射的剂量是1~1800mg/天。
9.权利要求1所述的抗登革病毒DE3的纳米抗体在制备抗登革热药物中的用途。
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