[发明专利]一种图书馆用的绿色无污染抗菌肽及其制备与应用

权利要求书

1.一种抗菌肽，其特征在于：所述的抗菌肽为rPc-Crustin 4或rPc-Crustin 5，rPc-Crustin 4的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示序列的26-127位氨基酸，rPc-Crustin 5的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示序列的25-167位氨基酸。

2.编码权利要求1所述的抗菌肽的基因，其特征在于：

rPc-Crustin 4抗菌肽基因的开放阅读框的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示序列的76-384位核苷酸；

rPc-Crustin 5抗菌肽基因的开放阅读框的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示序列的73-504位核苷酸。

3.权利要求1所述的抗菌肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)以提取的淡水小龙虾总RNA作为模板，进行反转录PCR得到cDNA；

(2)以步骤(1)获得的cDNA作为模板，进行PCR扩增获得含权利要求1所述抗菌肽编码序列的核苷酸片段；

(3)步骤(2)的扩增产物与原核表达载体通过酶切、连接、转化，构建可表达重组抗菌肽的大肠杆菌工程菌；

(4)步骤(3)构建的大肠杆菌工程菌通过诱导培养，表达出重组抗菌肽。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的抗菌肽为rPc-Crustin 4时，反转录引物为：5’-cccggtggaccgctagacgg-3’；PCR扩增引物为：F1：5′-N_ncactatggcttctacggt-3′，R1：5′-N_nctagacgggggccttgca-3′；

其中，N_n由保护碱基和限制性内切酶酶切位点组成。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的抗菌肽为rPc-Crustin 5时，反转录引物为：5’-caaagatcgggcacgatcaacaact-3’；PCR扩增引物为：F2：5′-N_ncatggctactacagtcac-3′，R2：5′-N_nctagacggtggctttgca-3′；

其中，N_n由保护碱基和限制性内切酶酶切位点组成。

6.权利要求1中抗菌肽rPc-Crustin 4和/或rPc-Crustin 5在制备抑菌剂或除菌剂中应用，其特征在于：抑菌或除菌的种类为金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、溶藻弧菌、白色念珠菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、副溶血性弧菌、哈维氏弧菌、肺炎克雷伯氏菌、毕赤酵母。

7.一种抑菌剂或除菌剂，其特征在于：包含权利要求1中的抗菌肽rPc-Crustin 4和/或rPc-Crustin 5。

8.根据权利要求7所述的抑菌剂或除菌剂，其特征在于：包含rPc-Crustin 4和rPc-Crustin 5时，两者质量比为1:1。

9.权利要求7或8所述的抑菌剂或除菌剂在图书馆防霉、除菌中的应用，其特征在于：防霉、除菌的种类为金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、溶藻弧菌、白色念珠菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、副溶血性弧菌、哈维氏弧菌、肺炎克雷伯氏菌、毕赤酵母。