[发明专利]乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针

说明书

本发明公开了一种乳腺癌MR‑荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针，该特异性分子探针包括超顺磁性氧化铁载体、曲妥珠单抗和荧光分子，所述超顺磁性氧化铁载体为PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒，所述超顺磁性氧化铁载体与曲妥珠单抗的氨基直接连接，荧光分子的末端羧基与曲妥珠单抗的氨基结合。本发明的乳腺癌MR‑荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针可以用于乳腺癌活体MR‑荧光双模态显像合并光热治疗。

技术领域

本发明涉及医疗健康技术领域，具体来说，涉及一种乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针。

背景技术

磁共振检查具有软组织分辨率高、无电离辐射，能够提供多参数、多对比度图像等特点，已经成为乳腺癌临床影像学检查最重要的检查方法。光学显像具有无放射性辐射和可重复检测等优点，已经被广泛应用于分子影像。有研究利用荧光显像对乳腺癌HER-2受体表达情况进行定性及定量检测，然而荧光显像也具有分辨率低、组织穿透性差等缺点。多模态纳米探针的出现使MRI和荧光显像的融合成为可能。磁性纳米微粒不仅能在一定程度上提高ICG荧光基团的光学成像效率，而且可以高分辨率显示病变。过去有研究利用装载了阿霉素的介孔二氧化硅，构建了MRI/荧光双模态成像纳米探针，将其应用于活体动物模型试验中，显示出了良好的诊疗一体化前景(Lee J E,Lee N,Kim H,et al.Uniformmesoporous dye-doped silica nanoparticles decorated with multiple magnetitenanocrystals for simultaneous enhanced magnetic resonance imaging,fluorescence imaging,and drug delivery[J].J Am Chem Soc,2010,132(2):552-557.(用于同时增强磁共振成像、荧光成像和药物输送的多个磁铁矿纳米晶体修饰的均匀介孔染料掺杂二氧化硅纳米粒子，美国化学会志，2010,132(2):552- 557))。目前，这种多功能纳米探针尚未在HER-2阳性乳腺癌方面的前临床研究中出现。

发明内容

针对相关技术中的上述技术问题，本发明提出一种乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针及其制备方法，能够克服现有技术的上述不足。

为实现上述技术目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针，包括超顺磁性氧化铁 (Superparamagnetic Iron Oxide，SPIO)载体、抗人类表皮生长因子受体2(HER-2)的单克隆抗体—曲妥珠单抗(trastuzumab)和荧光分子，所述超顺磁性氧化铁载体为PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒，所述超顺磁性氧化铁载体与曲妥珠单抗的氨基直接连接，荧光分子的末端羧基与曲妥珠单抗的氨基结合。

进一步的，PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒连接曲妥珠单抗分子的结合量为0.3174mg抗体/ml探针溶液，所述荧光分子为吲哚菁绿ICG-Sulfo-OSu。

根据本发明的另一方面，提供了上述乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针的制备方法，包括以下步骤：

(1)通过疏水间相互作用将DSPE-PEG2000分子包被到超顺磁性纳米颗粒表面，得到PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒；

(2)单抗预处理：通过30KD超滤管将曲妥珠单抗缓冲液替换为pH值为8.5的0.02mol/L硼酸盐缓冲液，再将2mg所述曲妥珠单抗加入到30KD超滤管中离心3次，每次加入1mL0.02mol/L硼酸盐缓冲液吹打均匀，减少曲妥珠单抗损失,然后将曲妥珠单抗吸出并定容到5mL，得到曲妥珠单抗溶液；