[发明专利]乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针在审
| 申请号： | 201811031658.3 | 申请日： | 2018-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN109331190A | 公开（公告）日： | 2019-02-15 |
| 发明（设计）人： | 洛小珺 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院肿瘤医院 |
| 主分类号： | A61K49/12 | 分类号： | A61K49/12;A61K49/16;A61K49/00;A61K41/00;A61P35/00;A61P15/14 |
| 代理公司： | 北京纽乐康知识产权代理事务所(普通合伙) 11210 | 代理人： | 李景华 |
| 地址： | 100021 北京市朝阳*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 超顺磁性氧化铁 特异性分子探针 光热治疗 双模态 乳腺癌 荧光 显像 曲妥珠单抗 合并 氨基 荧光分子 末端羧基 纳米颗粒 活体 | ||
1.一种乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针，其特征在于，包括超顺磁性氧化铁载体、曲妥珠单抗和荧光分子，所述超顺磁性氧化铁载体为PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒，所述超顺磁性氧化铁载体与曲妥珠单抗的氨基直接连接，荧光分子的末端羧基与曲妥珠单抗的氨基结合。
2.根据权利要求1所述的乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针，其特征在于，所述荧光分子为ICG-Sulfo-OSu。
3.根据权利要求1或2所述的乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）通过疏水间相互作用将DSPE-PEG2000分子包被到超顺磁性纳米颗粒表面，得到PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒；
（2）单抗预处理：通过30KD超滤管将曲妥珠单抗缓冲液替换为pH值为8.5的0.02mol/L硼酸盐缓冲液，再将2mg所述曲妥珠单抗加入到30KD超滤管中离心3次，每次加入1mL0.02mol/L硼酸盐缓冲液吹打均匀，减少曲妥珠单抗损失,然后将曲妥珠单抗吸出并定容到5mL，得到曲妥珠单抗溶液；
（3）纳米颗粒活化：取5mg PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒，调pH至5-6，然后加入1mgEDC分子，0.5mg NHS分子，置于恒温摇床反应25min，然后采用30KD超滤管去除EDC分子和NHS分子，离心两次；
（4）用步骤（2）得到的曲妥珠单抗溶液重悬步骤（3）得到的PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒，然后置于摇床反应结合2h，反应结束后，利用分子筛分离未反应的曲妥珠单抗，得到PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒和曲妥珠单抗的复合物，共收集4管，待测；
（5）利用pH计检测步骤（4）收集的PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒和曲妥珠单抗的复合物的pH值，并将pH值调至8.5，吸取100μg事先用超纯水溶解的荧光分子加入到PEG化超顺磁性氧化铁纳米颗粒和曲妥珠单抗的复合物中，在4℃反应10-12h，然后利用超滤管去除未反应的荧光分子，即得到乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针。
4.根据权利要求3所述的乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针的制备方法，其特征在于，步骤（2）中3次离心的转速均为3500rpm，每次离心时间均为8min。
5.根据权利要求3所述的乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针的制备方法，其特征在于，步骤（3）中恒温摇床内的温度为25℃，转速为180rpm。
6.根据权利要求3所述的乳腺癌MR-荧光双模态显像合并光热治疗的特异性分子探针的制备方法，其特征在于，步骤（3）中两次离心的转速均为3000rpm，每次离心时间均为5min。
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