[发明专利]木糖阿拉伯糖共利用的酿酒酵母菌的构建方法有效

专利信息
申请号: 201811024423.1 申请日: 2018-09-04
公开(公告)号: CN110872596B 公开(公告)日: 2021-08-24
发明(设计)人: 杨晟;王心;杨俊杰;蒋宇 申请(专利权)人: 中国科学院分子植物科学卓越创新中心
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63;C12N1/19;C12P7/06;C12R1/865
代理公司: 上海申浩律师事务所 31280 代理人: 贾师英
地址: 200032 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 阿拉伯糖 利用 酿酒 酵母菌 构建 方法
【权利要求书】:

1.一种木糖阿拉伯糖共利用的酿酒酵母菌株,其特征在于,作为构建基础的宿主酿酒酵母菌株是能够利用木糖转化为乙醇的酿酒酵母菌,其基因组上整合了12个以上拷贝的下述的阿拉伯糖代谢基因表达盒:

该阿拉伯糖代谢基因表达盒从上游至下游依次包括大肠杆菌来源的L-核酮糖激酶表达基因araB表达元件、地衣芽孢杆菌来源的阿拉伯糖异构酶表达基因araA表达元件、大肠杆菌来源的L-核酮糖-5-磷酸-4-差向异构酶表达基因araD表达元件、酿酒酵母来源的阿拉伯糖转运体基因GAL2表达元件和拟南芥来源的阿拉伯糖转运体基因STP2表达元件,其中,

基因araB表达元件包括PGI1启动子、基因araB、FBA1终止子;基因araA表达元件包括GAP启动子、基因araA、ADH1终止子;基因araD表达元件包括HXT7启动子、基因araD、PGI1终止子;基因GAL2表达元件包括FBA1启动子、基因GAL2、GAL2终止子;基因STP2表达元件包括TPI1启动子、基因STP2和PFK1终止子。

2.如权利要求1所述的酿酒酵母菌株,其特征在于,所述基因araA表达元件的碱基序列为SEQ ID NO: 1,基因araB表达元件的碱基序列为SEQ ID NO: 2,基因araD表达元件的碱基序列为SEQ ID NO: 3,基因GAL2表达元件的碱基序列为SEQ ID NO: 4,基因STP2表达元件的碱基序列为SEQ ID NO: 5。

3.如权利要求1或2所述的酿酒酵母菌株,其特征在于,不包含基因STP2表达元件。

4.如权利要求1或2所述的酿酒酵母菌株,其特征在于,所述的阿拉伯糖代谢基因表达盒被克隆在一种质粒上。

5.如权利要求4所述的酿酒酵母菌株,其特征在于,质粒骨架为SEQ ID NO: 6。

6.如权利要求1所述的酿酒酵母菌株,其特征在于,所述酿酒酵母菌是二倍体酿酒酵母。

7.如权利要求6所述的酿酒酵母菌株,其特征在于,所述酿酒酵母菌是菌株CIBTS0735。

8.一种构建如权利要求1-7中任一项所述的酿酒酵母菌株的方法,包括如下步骤:通过将如权利要求4中所述的质粒导入酿酒酵母而将所述的阿拉伯糖代谢基因表达盒整合到酿酒酵母染色体上,即可得到共利用木糖和阿拉伯糖的酿酒酵母菌。

9.如权利要求1-7中任一项所述的酿酒酵母菌株在发酵法生产乙醇中的用途。

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