[发明专利]一种悬浮酵母菌富集动物粪便中镉的方法

说明书

本发明公开了一种悬浮酵母菌富集动物粪便中镉的方法，涉及生物工程技术领域。本发明包括：酵母菌增殖培养：依次将酵母菌种在无菌条件下用接种环接种于琼脂斜面培养基、平板培养基和种子培养基上进行培养；动物粪便处理：取动物粪便加去离子水葡萄糖、酵母浸膏搅拌均匀并于121℃、进行高压灭菌，将所得悬浊液放置于恒温箱中37℃条件下培养；调节悬浊液中镉离子含量和PH；动物粪便镉富集：向悬浊液中接种1‑5％重量的种子培养基中的酵母菌；摇瓶培养120‑160小时后收获菌液。本发明通过进行酵母菌增殖培养，并动物粪便处理形成适宜酵母菌生长的PH和镉离子浓度含量的调节，利用酵母菌实现对动物粪便中的镉离进行富集。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，特别是涉及一种悬浮酵母菌富集动物粪便中镉的方法。

背景技术

随着集约化、规模化养殖业的迅速发展，各种重金属微量元素广泛应用于饲料添加剂的生产，导致大量的铜、铁、锌等重金属随着畜禽粪便排放到环境中，造成严重的环境污染；当这种含有大量重金属的畜禽粪便长期施用于农田时，可造成土壤的重金属污染，其中的重金属元素在土壤-水-植物系统中积累转化，并最终通过食物链对人体健康造成威胁；因此，如何降低或去除畜禽粪便中重金属的污染风险对真正实现畜禽粪便资源化利用具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种悬浮酵母菌富集动物粪便中镉的方法，通过进行酵母菌增殖培养，并动物粪便处理形成适宜酵母菌生长的PH和镉离子浓度含量的调节，利用酵母菌实现对动物粪便中的镉离进行富集。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明为一种悬浮酵母菌富集动物粪便中镉的方法，包括如下步骤：

步骤1、酵母菌增殖培养：

S01、将酵母菌种在无菌条件下用接种环接种于琼脂斜面培养基上，于28-30℃下培养24小时；

S02、在无菌条件下用接种环将琼脂斜面培养基上的酵母菌接种于平板培养基上扩大培养；

S03、在无菌条件下，将平板培养基上生长24小时的酵母菌菌种接种到装有种子培养基的三角瓶中，并在旋转摇床上摇瓶培养24小时；

步骤2、动物粪便处理：

T01、取动物粪便加5-10倍重量去离子水搅拌混合均匀形成悬浊液；

T02、向悬浊液中添加葡萄糖、酵母浸膏并于121℃、进行高压灭菌，将所得悬浊液放置于恒温箱中37℃条件下培养24-48小时；

T03、证明悬浊液中无菌后、取样测量悬浊液中的镉离子含量，并加无菌水稀释或低温浓缩至悬浊液中镉离子含量为0.1mmol/L-1mmol/L；

T04、向悬浊液中添加PH调节剂调节PH至4.5-5.5；

步骤3、动物粪便镉富集：

M01、向悬浊液中接种1-5％重量的种子培养基中的酵母菌；

M02、将接种有酵母菌的悬浊液装入三角瓶中，在旋转摇床上摇瓶培养120-160小时后收获菌液，将菌液过滤后再进行离心弃上清液，然后用去离子水清洗再离心，重复操作3-5次收获菌体，在60-70℃条件下将菌体烘干即得富集有镉离子的酵母菌菌体。

进一步地，所述琼脂斜面培养基以重量组分计包括去离子水800-1200份、葡萄糖15-25份、蛋白胨15-25份、酵母浸膏8-12份、琼脂粉15-25份；