[发明专利]一种筛选促干细胞归巢药物的方法、重组载体和细胞株在审
| 申请号： | 201811011004.4 | 申请日： | 2018-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN109136263A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 王莹;赵亮;徐冉驰;王强利;王亚辉;李英;国海东;蔡昊;付云飞;吴心语 | 申请（专利权）人： | 上海中医药大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/66;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海唯智赢专利代理事务所(普通合伙) 31293 | 代理人： | 吴瑾瑜 |
| 地址： | 201203 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组载体 干细胞归巢 稳转细胞株 筛选 荧光素酶报告基因 启动子序列 候选药物 心肌梗死 生物技术领域 高通量筛选 启动子表达 辅助治疗 活性水平 细胞株 荧光酶 可用 荧光 内参 刺激 检测 治疗 应用 | ||
1.一种重组载体，其特征在于，含有CXCR4启动子序列和luc2荧光素酶报告基因；所述的luc2荧光素酶报告基因位于CXCR4启动子序列下游。
2.权利要求2所述的重组载体，其特征在于，为含有CXCR4启动子序列和luc2荧光素酶报告基因的pGL4.17载体。
3.一种稳转细胞株，其特征在于，含有权利要求1或2所述的重组载体以及表达内参荧光酶的载体。
4.权利要求3所述的稳转细胞株，其特征在于，所述的内参荧光酶为海肾荧光素酶。
5.权利要求3所述的稳转细胞株，其特征在于，其宿主细胞为人胚肾上皮细胞293。
6.权利要求1或2所述的一种重组载体在检测CXCR4启动子表达的活性、CXCR4启动子表达的活性、筛选促干细胞归巢的药物或者筛选治疗或辅助治疗心肌梗死的药物方面的应用。
7.权利要求3～5任一项所述的稳转细胞株在筛选促干细胞归巢的药物或者筛选治疗或辅助治疗心肌梗死的药物方面的应用。
8.一种筛选促干细胞归巢的药物或者筛选治疗或辅助治疗心肌梗死的药物的方法，其特征在于，用权利要求3～5任一项所述的稳转细胞株，加入候选药物进行刺激，与阴性对照组相比，用双荧光报告基因检测系统检测luc2和内参荧光素酶的活性值，通过luc2相对荧光强度，评价该候选药物促进CXCR4启动子表达的活性，筛选能够激活CXCR4启动子转录活性的药物。
9.权利要求8所述的方法，其特征在于，加入候选药物后，作用12～48小时，再检测luc2和内参荧光素酶的活性值。
10.权利要求8所述的方法，其特征在于，能够提高luc2和内参荧光酶相对活性的候选药物进一步用Western Blot法检测CXCR4的表达量，验证候选药物的活性。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海中医药大学，未经上海中医药大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811011004.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
