[发明专利]一种提取肉糜中界面蛋白的方法在审
申请号: | 201811005026.X | 申请日: | 2018-08-30 |
公开(公告)号: | CN109456386A | 公开(公告)日: | 2019-03-12 |
发明(设计)人: | 杨慧娟;陈黎洪;唐宏刚;肖朝耿;谌迪 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K1/30 |
代理公司: | 郑州万创知识产权代理有限公司 41135 | 代理人: | 郭艳玲;薛雁超 |
地址: | 310021 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 混合液 乳化层 蛋白 肉糜 二级缓冲 缓冲混合 搅拌混匀 离心处理 一级缓冲 一级乳化 蛋白质溶液 磷酸缓冲液 多次离心 功能性质 技术支撑 品质分析 去离子水 肉糜制品 重复操作 缓冲液 冻存 解冻 清洗 上层 分析 | ||
1.一种提取肉糜中界面蛋白的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)将磷酸缓冲液加入肉糜中并搅拌混匀,得到一级缓冲混合液;
(2)将步骤(1)中的一级缓冲混合液进行离心处理,得到上层的乳化层、中层的肌肉蛋白质溶液层与下层的沉淀物层,并收集上层的乳化层,得到一级乳化层;
(3)向步骤(2)中的一级乳化层中加入去离子水并搅拌混匀,得到一级清洗混合液,并将一级清洗混合液进行离心处理,得到上层的乳化层与下层的去离子水层,并收集上层的乳化层,得到二级乳化层;
(4)二级乳化层重复步骤(3)处理后得到三级乳化层,依此类推,重复步骤(3)多次,进而得到终级乳化层;
(5)向步骤(4)中得到的终级乳化层中加入Trix缓冲液并搅拌混匀,得到二级缓冲混合液,将二级缓冲混合液在-20℃下冻存12h,并在4℃下解冻,再在-20℃下冻存12h,并在4℃下解冻,如此重复操作多次冻存并解冻过程,进而得到终级缓冲混合液;
(6)将步骤(5)中的终级缓冲混合液进行离心处理,得到上层的脂肪层与下层的蛋白质溶液层,然后收集下层的蛋白质溶液层,得到界面蛋白。
2.根据权利要求1所述的提取肉糜中界面蛋白的方法,其特征在于步骤(1)中,
肉糜是由下列重量份配比的原料配制而成:瘦肉1490-1510份、肥肉470-490份、冰水400-415份、食盐20-30份;
肉糜的制备方法包括以下步骤:
(1.1)按所述配比量分别称取各原料,并将称得的各原料分别盛装在对应容器中;
(1.2)剔除步骤(1.1)中称得的瘦肉中的结缔组织,得到精制瘦肉;
(1.3)将步骤(1.1)中称得的肥肉与步骤(1.2)中的精制瘦肉分别用绞肉机绞碎,得到碎肥肉与碎瘦肉;
(1.4)将步骤(1.3)中的碎瘦肉于1490-1510rpm下斩拌25-35s,得到一级斩拌碎肉,然后将步骤(1.1)中称得的食盐和2/3的冰水加入一级斩拌碎肉中,得到一级碎肉混合物,再将一级碎肉混合物于2990-3010 rpm下斩拌55-65s后暂停115-125s,得到二级斩拌碎肉,再将步骤(1.3)中的碎肥肉与步骤(1.1)中称得的1/3的冰水加入二级斩拌碎肉中,得到二级碎肉混合物,然后将二级碎肉混合物于1490-1510rpm下斩拌55-65s,得到三级斩拌碎肉,再将三级斩拌碎肉于2990-3010rpm下斩拌60-90s,进而得到肉糜,并将肉糜灌入肠衣中以备用,且该步骤中斩拌温度控制于9-11℃。
3.根据权利要求1所述的提取肉糜中界面蛋白的方法,其特征在于步骤(1)中,磷酸缓冲液的浓度为0.2 mol·L-1,磷酸缓冲液的pH值为6.5。
4.根据权利要求1所述的提取肉糜中界面蛋白的方法,其特征在于步骤(1)中,肉糜与磷酸缓冲液的混合份数比例为1:2.9-1:3.1,其中肉糜的份数为重量份数,且肉糜的单位为g,磷酸缓冲液的份数为体积份数,且磷酸缓冲液的单位为mL,并且搅拌的时间为55-65s。
5.根据权利要求1所述的提取肉糜中界面蛋白的方法,其特征在于步骤(2)中,离心处理的条件为:离心力10000×g,离心时间18-22min。
6.根据权利要求1所述的提取肉糜中界面蛋白的方法,其特征在于步骤(3)中,一级乳化层与去离子水的混合份数比例为1:2.9-1:3.1,其中一级乳化层的份数为重量份数,且一级乳化层的单位为g,去离子水的份数为体积份数,且去离子水的单位为mL。
7.根据权利要求1所述的提取肉糜中界面蛋白的方法,其特征在于步骤(3)中,离心处理的条件为:离心力10000×g,离心时间18-22min,离心温度4℃。
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