[发明专利]一种柏子养心丸含量的测定方法

权利要求书

1.一种柏子养心丸含量的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：对照品溶液的制备

分别准确称取对照品阿魏酸和五味子乙素，各加甲醇溶解并经稀释后，分别得到阿魏酸对照品溶液和五味子乙素对照品溶液；

步骤2：待测样品溶液的制备

准确称取待测的柏子养心丸样品，精密加入40％(v/v)～60％(v/v)的乙醇，经预处理，得到待测样品溶液；

步骤3：液相色谱分离

色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；以甲醇为流动相A，以0.1％(v/v)的冰醋酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；梯度洗脱程序如下：0～70min，流动相A为20％，流动相B为80％；70～85min，流动相A为80％，流动相B为20％；85～95min，流动相A为20％，流动相B为80％；检测波长如下：0～31min，转换波长为335nm；31～52min，转换波长为285nm；52～85min，转换波长为215nm；

步骤4：柏子养心丸中五种成分的色谱峰保留时间的确定

分别精密吸取步骤1得到的阿魏酸对照品溶液、五味子乙素对照品溶液和步骤2得到的待测样品溶液，注入液相色谱仪，进行测定，采用不同色谱柱，对阿魏酸、桂皮醛、五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素五种成分保留时间进行了测定，得到了不同的保留时间，取其平均值作为其标准保留时间；选择阿魏酸、五味子乙素两种成分作为对照，采用标准保留时间与实测保留时间绘制保留时间标准曲线，将桂皮醛、五味子醇甲、五味子甲素三种待测成分的标准保留时间代入该标准曲线，从而得到各成分的对照保留时间；

在待测的柏子养心丸样品的液相色谱图中，出现阿魏酸、桂皮醛、五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素五种成分的对照保留时间相应的色谱峰；

步骤5：定量检测

分别精密吸取步骤1得到的阿魏酸对照品溶液和步骤2得到的待测样品溶液，注入液相色谱仪，进行测定，采用峰面积及校正因子，再分别按如下公式计算得到阿魏酸、桂皮醛、五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素五种成分的含量；

式中，C为待测成分的浓度；f为校正因子；A为待测成分的峰面积；A_i为阿魏酸对照品峰面积；C_i为阿魏酸对照品溶液的浓度。

2.根据权利要求1所述的一种柏子养心丸含量的测定方法，其特征在于，步骤1中，所述阿魏酸对照品溶液中，每1mL含20μg阿魏酸；所述五味子乙素对照品溶液中，每1mL含20μg五味子乙素。

3.根据权利要求1所述的一种柏子养心丸含量的测定方法，其特征在于，步骤2中，所述柏子养心丸预先经过研细或切碎；所述柏子养心丸的重量为6g-9g，所述乙醇的体积为25mL-50mL。

4.根据权利要求1所述的一种柏子养心丸含量的测定方法，其特征在于，步骤2中，所述预处理为超声处理或者加热回流，所述超声处理的功率为500w，频率为40KHz，时间为30min；所述加热回流的时间为30min。

5.根据权利要求1所述的一种柏子养心丸含量的测定方法，其特征在于，步骤3中，所述色谱柱的型号为Techmate C₁₈色谱柱、Agela Venusial MP C₁₈色谱柱、月旭Ultimate XBC₁₈色谱柱、Agilent Zorbax C₁₈色谱柱中的一种。

6.根据权利要求5所述的一种柏子养心丸含量的测定方法，其特征在于，所述TechmateC₁₈色谱柱的柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm；所述Agela Venusial MP C₁₈色谱柱的柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm；所述月旭Ultimate XB C₁₈色谱柱的柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm；所述Agilent Zorbax C₁₈色谱柱的柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm。

7.根据权利要求1所述的一种柏子养心丸含量的测定方法，其特征在于，步骤5中，所述校正因子f按如下公式计算：

式中，f为校正因子；A_i为阿魏酸对照品的峰面积；A_r为待测成分对照品的峰面积；C_i为阿魏酸对照品的浓度；C_r为待测成分对照品的浓度。