[发明专利]一种鸟苷四磷酸的超高效液相色谱检测方法在审
| 申请号: | 201810994060.8 | 申请日: | 2018-08-29 |
| 公开(公告)号: | CN109932439A | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
| 发明(设计)人: | 罗来鑫;白凯红;蒋娜;李健强;曹永松 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
| 代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 陈波 |
| 地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 流动相 超高效液相色谱 磷酸 鸟苷 检测 反相C18色谱柱 化学分析技术 色谱条件 梯度洗脱 洗脱条件 有效检测 缓冲液 进样量 色谱柱 基线 甲醇 乙腈 节约 | ||
1.一种鸟苷四磷酸的超高效液相色谱检测方法,其特征在于,包括如下步骤,采用如下色谱条件:
色谱柱:反相C18色谱柱;
流动相:包括流动相A与流动相B;
所述流动相A为甲醇或乙腈,所述流动相B为KH2PO4溶液或K2HPO4-KH2PO4缓冲液;
洗脱条件为:流动相A:流动相B=3-10:90-97。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述KH2PO4溶液或K2HPO4-KH2PO4缓冲液含有正四丁基溴化铵。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述KH2PO4溶液的浓度为0.1-0.2mol/L;所述K2HPO4-KH2PO4缓冲液的浓度为0.025-0.15mol/L。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述正四丁基溴化铵的浓度为2.5~12mmol/L。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述正四丁基溴化铵的浓度为5~10mmol/L。
6.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,色谱条件还包括:检测器为DAD检测器,检测波长为250~260nm。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,色谱条件还包括:柱温控制为25~37℃。
8.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,色谱条件还包括:进样量为5~20μL,流速为0.1~0.4mL/min。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述色谱柱柱长为150mm。
10.根据权利要求1-9任一项所述的方法,其特征在于,包括步骤如下:
(1)制备一系列浓度梯度的鸟苷四磷酸标准品,按色谱条件,进行超高效液相色谱检测,根据不同浓度标准品的色谱图数据,绘制峰面积与浓度的相关标准曲线;
(2)制备检测样品,超高效液相色谱检测,得到峰面积,根据峰面积,利用标准曲线,计算得到检测样品的浓度。
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