[发明专利]一种测定O/W型紫草护肤乳中紫草素的前处理方法及高效液相色谱方法

权利要求书

1.一种测定O/W型紫草护肤乳中紫草素的前处理方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）将O/W型紫草护肤乳与油脂混合，破乳萃取，取油脂层；

（2）将油脂层与碱水溶液混合，静置萃取，取下层碱水层；

（3）向碱水层中加入酸，调节溶液pH至4～6，加入有机溶剂，静置萃取，取下层有机层，去除有机层的有机溶剂，获得固体紫草素；

步骤（1）中所述破乳萃取在高速均质或超声的条件下进行；

步骤（2）中所述碱水溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钠溶液；碱水溶液的浓度为1wt%～10wt%；

所述高速均质的转速为5000～15000 rpm，高速均质的时间为3～10 min；

所述超声的条件为：超声功率为450～1500W，超声频率为15～35 KHz，超声时间120～300 s；

步骤（3）中所述有机溶剂为四氯化碳、氯仿、二氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯、乙酸丁酯中的一种以上；

步骤（1）中所述油脂为天然植物油、合成油脂或矿物油脂中一种以上；

所述天然植物油为霍霍巴油、蓖麻油、橄榄油、杏仁油、山茶籽油、椰子油、沙棘果油、葵花籽油中一种以上；所述合成油脂为辛酸/癸酸甘油三酯、异壬酸异壬酯、异硬脂酸异丙酯、油醇芥酸酯、辛酸丙基庚酯、季戊四醇四辛酸酯、油酸癸酯、角鲨烷中的一种以上；所述矿物油脂为白矿油、异十六烷中的一种以上；

步骤（1）中，破乳萃取后，将产物进行离心，分离出油脂层；所述离心的转速为1000～6000 r/min，离心时间为10～30 min；

步骤（1）中所述油脂与护肤乳的质量比为2:1～5:1；

步骤（1）中所述破乳萃取的次数为2~5次；破乳萃取后，将产物进行离心，上层为油脂层，向下层沉淀中加入油脂，重复破乳萃取的步骤；

步骤（2）中所述萃取的次数为3~5次，每次萃取时碱水溶液的用量为油脂质量的1~5倍，静置的时间为10～30 min；

步骤（3）中所述酸为盐酸；酸的浓度为5wt～10wt%。

2.根据权利要求1所述测定O/W型紫草护肤乳中紫草素的前处理方法，其特征在于：

步骤（3）中pH为5.0；

步骤（3）中所述萃取的次数为3~5次，每次萃取时有机溶剂的用量为加入盐酸后溶液质量的0.1~3倍，静置的时间为10～30 min。

3.一种测定O/W型紫草护肤乳中紫草素的高效液相色谱方法，其特征在于：包括以下步骤：

（a）将m₀质量的O/W型紫草护肤乳按照前处理方法进行处理，获得固体紫草素；采用甲醇将固体紫草素配成溶液，获得待测样品，待测样品的体积为V；所述前处理方法为权利要求1~2任一项所述的前处理方法；

（b）利用紫草素标准样品，配置一系列不同浓度的标准溶液，通过高效液相色谱法测定，建立标准曲线，并制作线性回归方程；

（c）采用高效液相色谱仪对待测样品中紫草素进行检测，获得色谱图；

（d）利用紫草素标准曲线及线性回归方程，采用外标法，根据待测样品紫草素峰面积计算待测样品中紫草素含量即紫草素在待测样品中的浓度C；

（e）根据紫草素在待测样品中的含量以及待测样品的体积，计算m₀质量的O/W型紫草护肤乳中紫草素含量。

4.根据权利要求3所述测定O/W型紫草护肤乳中紫草素的高效液相色谱方法，其特征在于：步骤（e）中O/W型紫草护肤乳中紫草素含量的计算公式：

；

C：待测样品中紫草素的浓度，mg/mL；

V：待测样品的体积，mL；

m₀：紫草护肤乳的取样量，mg。