[发明专利]一种毛囊干细胞的原代分离方法有效
| 申请号： | 201810988011.3 | 申请日： | 2018-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN109097321B | 公开（公告）日： | 2021-07-02 |
| 发明（设计）人： | 陈海佳;葛啸虎;王一飞;张梦晨;王小燕 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 刘伟;赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市开发区广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 毛囊 干细胞 分离 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种毛囊干细胞的原代分离方法，其特征在于，取头皮组织预处理后加中性蛋白酶4℃消化12 h，清洗后顺毛囊生长方向拔出完整的毛囊接种到L-多聚赖氨酸包被的培养瓶中加入Lonza无血清培养基培养 ，待细胞汇合度长至80%-90%时传代；
所述中性蛋白酶的浓度为0.5U/ml；
所述包被培养瓶的L-多聚赖氨酸的浓度为100μg/ml，分子量为150000-300000，所述包被方法为37℃孵育2h；
所述培养为放入37℃、5%CO2浓度的培养箱中培养，首次换液应间隔72h，之后每2天换一次液。
2.根据权利要求1所述的原代分离方法，其特征在于，所述预处理为剪去头皮组织外毛发及皮下组织中的脂肪和结缔组织，剪成3~5 mm 宽的皮条，用氯化钠注射液清洗后置于75%乙醇中清洗，再用氯化钠注射液清洗后剪成细小组织块。
3.根据权利要求1所述的原代分离方法，其特征在于，所述清洗为氯化钠注射液清洗。
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