[发明专利]一种用于检测人巨细胞病毒的试剂盒在审
| 申请号： | 201810979964.3 | 申请日： | 2018-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN109022620A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 李静静;李振红;杜美;鲁清月;付光宇;吴学炜;苗拥军 | 申请（专利权）人： | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 450016 河南省郑州*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 人巨细胞病毒 试剂盒 内标 检测 特异性PCR引物 弱阳性质控品 定量参考品 特异性引物 阳性质控品 阴性质控品 标准单位 定量检测 定量结果 发明试剂 交叉干扰 可追溯性 快速检测 酶混合液 世界卫生 荧光探针 重复序列 病原体 对引物 检出限 灵敏度 核酸 探针 溯源 参考 疾病 | ||
1.一种用于检测人巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：包括用于人巨细胞病毒DNA检测的特异性PCR引物和荧光探针、DNA内标检测的特异性引物和探针、PCR反应缓冲液、酶混合液、DNA内标、阴性质控品、强阳性质控品、弱阳性质控品和定量参考品A、B、C、D；其中
所述用于人巨细胞病毒DNA检测的特异性PCR引物包括引物1和引物2，所述引物1和引物2的序列为：
引物1：5’- AACTGCCTCACCCACCTGC -3’，
引物2：5’- AACGATGGAGGACGACCAACAC -3’；
所述用于DNA内标检测的特异性引物包括引物3和引物4，所述引物3和引物4的序列为：
引物3：5’- GAAGGCTCATGGCAAGAAAG -3’，
引物4：5’- CTCACTCAGTGTGGCAAAGG -3’；
所述用于人巨细胞病毒DNA检测的探针为探针1，其序列为：
探针1：FAM- AAACACCATCTTTCCGGAGGTGCGGT –BHQ1，
所述用于DNA内标检测的探针为探针2，其序列为：
探针2：ROX- CTTGAGGTTGTCCAGGTGAGCCAG–BHQ2。
2.根据权利要求1所述的用于检测人巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述PCR反应缓冲液包括pH7.0-pH9.0 20-100mM三(羟甲基)甲基甘氨酸溶液和50-200mM乙酸钾。
3.根据权利要求1所述的用于检测人巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述酶混合液包括双功能DNA聚合酶、尿嘧啶DNA糖基化酶和dUTP。
4.根据权利要求1所述的用于检测人巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述DNA内标为人工构建的质粒。
5.根据权利要求1所述的用于检测人巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述阴性质控品为无菌生理盐水。
6.根据权利要求1所述的用于检测人巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述强阳性质控品和弱阳性质控品均为含人巨细胞病毒DNA片段的质粒，其中强阳性质控品浓度经溯源为4.0E+04 IU/ml，弱阳性质控品浓度经溯源为4.0E+02IU/ml。
7.根据权利要求1所述的用于检测人巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述定量参考品A、B、C、D为含人巨细胞病毒DNA片段的质粒，其中定量参考品A、B、C、D的浓度经溯源为1.0E+05 IU/ml、1.0E+04 IU/ml、1.0E+03 IU/ml、1.0E+02 IU/ml。
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