[发明专利]化合物lithocarpinol B及其制备方法和在制备抗真菌药物中的应用

权利要求书

1.化合物lithocarpinol B，其特征在于，结构如式（І）所示：

式（І）。

2.一种权利要求1所述的化合物lithocarpinol B的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备Phomopsis lithocarpus FS508的发酵培养物，用乙酸乙酯萃取该发酵培养物，将乙酸乙酯萃取液经蒸馏浓缩后得到浸膏；用甲醇水溶液溶解浸膏，然后用石油醚萃取，萃取剩下的甲醇水溶液部分蒸馏浓缩得到棕黑色浸膏；

（2）将棕黑色浸膏过正相硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯从10:1, 7:1, 9:2, 3:1, 2:1,1:1, 1:2 v/v梯度洗脱，收集石油醚：乙酸乙酯体积比3:1洗脱的馏分F6，组分F6经Sephadex LH-20柱，以二氯甲烷：甲醇=1:1 v/v作为洗脱剂，收集TLC薄层层析以石油醚：乙酸乙酯=2:1 v/v展开得Rf=3.0/3.8的组分，然后过正相硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯从6:1, 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 0:1 v/v梯度洗脱，收集TLC薄层层析以二氯甲烷：甲醇=20:1v/v展开得Rf=3.3/3.6的组分，再用HPLC纯化得到化合物lithocarpinol B；

所述的HPLC纯化是用全制备HPLC分离该组分，全制备HPLC的色谱条件为： YMC ODS-A柱，流动相为体积比85:15的甲醇/水，流速为8 mL/min，于保留时间14.8min处收集洗脱馏分，最后用半制备HPLC纯化该组分，半制备HPLC的色谱条件为：YMC-pack ODS-A/AQ柱，流动相为体积比82:18的乙腈/水，流速为3 mL/min，保留时间9.4min，得到化合物lithocarpinol B；

所述的Phomopsis lithocarpus FS508保藏编号为：GDMCC NO：60433。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的制备Phomopsis lithocarpusFS508的发酵培养物是将活化的Phomopsis lithocarpus FS508菌种接入到马铃薯葡萄糖液体培养基中，28 ℃，120 rpm，培养5 d制得种子液，将种子液以10% mL/g的接种量接入到大米固体发酵培养基中，室温下静置培养一个月，制得发酵培养物，所述马铃薯葡萄糖液体培养基通过以下方式获得：将马铃薯洗净去皮，切成大小约为1 cm³的小块，称量200 g，放入1 L水中煮沸20~30分钟，用双层纱布过滤，取滤液，在滤液中加入海盐15 g、葡萄糖20 g，加水补足1 L，灭菌制得；所述的大米固体发酵培养基通过以下方式获得：分别称量3 g 海盐和160 g大米，加200 mL水，搅拌混合，灭菌制得。

4.深海真菌Phomopsis lithocarpus FS508在制备权利要求1所述的化合物lithocarpinol B中的应用；所述的Phomopsis lithocarpus FS508保藏编号为：GDMCC NO：60433。

5.权利要求1所述的化合物lithocarpinol B在制备抗黄曲霉的药物中的应用。

6.一种抗真菌药物，其特征在于，含有权利要求1所述的化合物lithocarpinol B作为有效成分。

7.根据权利要求6所述的抗真菌药物，其特征在于，所述的抗真菌药物为抗黄曲霉的药物。