[发明专利]一种筛选高效固氮溶磷菌的方法

说明书

本发明公开了一种筛选高效固氮溶磷菌的方法，首先将土壤与水混合后震荡培养，离心后弃去上清液；按比例向沉淀中加入含外加碳源溶磷培养基,进行培养；所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源固氮培养基，进行培养；所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源溶磷培养基，进行培养；交替进行培养多次后，采用溶磷固氮培养基筛选出目标菌株。通过采用固氮培养基和溶磷培养基两种培养基交替培养的方法进行筛选，接着将驯化培养液稀释后涂布筛选出单株菌。极大的缩短了筛选周期。具有选择性强、工作量小、能大大缩短筛选周期等优点，是一种高效、快速的筛选固氮溶磷菌方法。

技术领域

本发明涉及一种环境微生物技术，尤其涉及一种筛选高效固氮溶磷菌的方法。

背景技术

土壤氮磷元素缺乏是影响粮食作物或其他植物生物量的重要因素，普通通过施加大量的氮肥、磷肥等增加土壤中的氮磷含量。但是这类化肥利用率较低，未被植物及时利用的氮磷化合物，若以不能被土壤胶体吸附，就会随下渗的土壤水转移至土壤深处从而造成污染，可导致河流、湖泊的富营养化等。而从土壤中直接筛选出具有高效固氮溶磷的微生物，即能够起到提高土壤氮磷的作用，还不会对土壤造成污染。所以开发高效经济的固氮溶磷技术具有重要意义。

目前，筛选具有固氮或溶磷的富集筛选方法成熟，但是对具有高效聚磷能力的固氮菌株的富集筛选方法较少。目前比较常用的筛选方法是通过固氮培养基富集固氮菌，然后通过固体培养基进行分离纯化，筛选的单菌落进行解磷效果试验。该方法富集时间较长，且筛菌针对性较低，使得筛菌效率大大降低。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效、快速的筛选高效固氮溶磷菌的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明的筛选高效固氮溶磷菌的方法，包括以下步骤：

(a)首先将土壤与水混合后震荡培养，离心后弃去上清液；

(b)按比例向沉淀中加入含外加碳源溶磷培养基,进行培养；

(c)将步骤(b)所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源固氮培养基，进行培养；

(d)将步骤(c)所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源溶磷培养基，进行培养；

(e)按照步骤(c)和(d)的方法交替进行培养多次；

(f)采用溶磷固氮培养基筛选出目标菌株。

由上述本发明提供的技术方案可以看出，本发明实施例提供的筛选高效固氮溶磷菌的方法，根据的生长特点，采用两种培养基快速筛菌，分别选用不同的培养基，大大缩短了菌株富集时间,采用溶磷固氮固体培养基进行具有高效聚磷能力的固氮菌株的筛选，最终大大缩短了筛菌时间。

具体实施方式

下面将对本发明实施例作进一步地详细描述。本发明实施例中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。

本发明的筛选高效固氮溶磷菌的方法，其较佳的具体实施方式是：

包括以下步骤：

(a)首先将土壤与水混合后震荡培养，离心后弃去上清液；

(b)按比例向沉淀中加入含外加碳源溶磷培养基,进行培养；

(c)将步骤(b)所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源固氮培养基，进行培养；

(d)将步骤(c)所得培养液离心后弃去上清液，按比例加入不含外加碳源溶磷培养基，进行培养；

(e)按照步骤(c)和(d)的方法交替进行培养多次；

(f)采用溶磷固氮培养基筛选出目标菌株。