[发明专利]一种枇杷干复合发酵提取物的制备及其应用

说明书

本发明属于烟用香料技术领域，具体涉及一种枇杷干复合发酵提取物的制备方法及应用。以野生枇杷干为主要提取物，将芽孢杆菌BA‑01活化后，在28‑30℃摇床培养24‑48h发酵，再进行回流提取、过滤、浓缩，得到烟用香料。该方法制得的烟用香精能够显著地提高卷烟的香气质量，降低刺激性，增加了甜润感和生津感，可明显改善卷烟品质。

技术领域

本发明属于烟用香料技术领域，尤其涉及一种野生枇杷干复合发酵提取物。同时，本发明还涉及所述烟用香料的制备方法和在卷烟中的应用。

背景技术

微生物发酵技术可以制备香料或进行香料的转化，节约能源、降低成本。从烟叶中筛选的芽孢杆菌产香性能好，以适当的天然植物为底物，可制备天然香料添加剂，用于卷烟加香。

CN201710343989.X公开了一种芽孢杆菌BA-01在烟草方面的应用，其通过提取的BA-01以提高晾晒烟的人工陈化效果，但其制取工艺复杂，需要在发酵后离心，并在菌液中加入海藻糖保护剂，后冷冻干燥成粉剂，喷洒于晾晒烟丝，进行人工陈化。

野枇杷产自湖南衡阳，当地人又称“毛枣子”，阴历七月结果，果子成熟后呈黄色，有五角星形状的果蒂，食用起来清凉甜润。野生枇杷干是采用野枇杷自然晾晒而成，最大限度的保留了野枇杷的营养，复水后风味和鲜果无异，具有止咳化痰、润肺清火之功效。CN201710431065.5公开了一种高静压协同酶解制备枇杷花烟用香料的方法和应用，其公开了预处理，酶解处理，丙二醇、水复合提取，高静压法二次提取，过滤封装等步骤。但其为了提纯，增加了工艺的复杂度。目前，野枇杷干常用于本地人泡水喝，在工业上还未见应用。本发明第一次将野枇杷干进行复配提取和发酵，并作为烟用香精应用到卷烟生产中。

发明内容

本发明提供了一种利用微生物发酵技术制备的枇杷干复合提取物及其在卷烟中的应用，通过本发明制得的香精与卷烟吸味相谐调，可显著增强卷烟抽吸的甜润感，降低抽吸过程中口腔和喉部出现的灼热感和刺辣感，具有降低杂气，提升烟香等功效，从而达到增加烟气的浸润性，改善卷烟抽吸品质的目的。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种枇杷干复合发酵提取物的制备方法，其特征在于：以野生枇杷干为主料先进行复配，利用芽孢杆菌对复配物进行发酵，再对发酵液进行香味物质的提取和浓缩即得所需产品。

进一步地，所述芽孢杆菌分离筛选自烟叶表面；保藏日期2016年8月19日，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No.60064。

进一步地，按照以下步骤制备得到：

（1）原料复配：野生枇杷晒制成的枇杷干，泡煮复水后取出枇杷，将枇杷与红枣、枸杞、甘草进行复配混合，得到第一复配产物；

（2）菌种活化：将芽孢杆菌BA-01接种于斜面培养基上28℃，活化培养2-3d；所述斜面培养基为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 10g，琼脂糖15g，蒸馏水1000mL，调pH至7.0；

（3）扩大培养：将菌种从斜面培养基上挑1-2环接种于固体培养基上纯化1-2次，确定无杂菌污染后，将其接种于LB液体培养基中，28℃摇瓶培养48h；

（4）发酵：将所述第一复配产物粉碎后，加入灭菌水，混合均匀，按5-15%的比例接种芽孢杆菌活化菌液，28-30℃摇床震荡培养48-72h，得到发酵液；

（5）香料提取：取步骤（4）所得发酵液，回流提取2-3h，真空抽滤，取续滤液，减压浓缩，即得所需烟用香料。

进一步地，枇杷与红枣、枸杞、甘草的复配比例为：85~90:3:3:4~9。

进一步地，所述烟用香料在烟丝中用量为0.1-0.5%。