[发明专利]一种干细胞生长因子原液的制备工艺方法

说明书

本发明公开了一种干细胞生长因子原液的制备工艺方法，本发明属于生物工程中的蛋白筛选浓缩技术领域,具体涉及Westernblot、透析及超滤技术获得高纯度蛋白质，并领用先进的导入技术，导入人类面部皮肤的真皮激活表皮再生及胶原蛋白的表达，达到面部除皱祛斑抗衰老的效果，利用Westernblot分子生物学实验技术定性检测干细胞培养基上清中是否含有bFGF、EGF、KGF蛋白，对培养基上清进行透析处理，根据生长因子EGF的分子量6KD，我们选择最大截留量为3500D的透析袋，选择透析脱水剂，我们选择PEG6000作为吸水剂，它在水中溶解性很大，被广泛应用于化妆品行列，该干细胞生长因子原液的制备工艺方法可以人体人体皮肤产生很好的影响，使皮肤变得红润，紧致，皱纹也显著的淡化。

技术领域

本发明属于生物工程中的蛋白筛选浓缩技术领域，尤其设计一种干细胞生长因子原液的制备工艺方法。

背景技术

干细胞再生因子原液是在人体干细胞培养过程中加以诱导，在传代过程中，选取最利于皮肤优化延缓衰老的时间点提取富含多种细胞活性因子的干细胞原液，经现代生物技术再处理制成原液，具有除皱、美白、淡斑、紧致等多种抗衰功效。

随着研究的深入我们对于干细胞再生因子原液功能及作用机制产生了更多的思考，如它是否与肌肤修复密切相关，它是否对衰老起抑制作用，它是否能够促进角质层细胞生长和新陈代谢等等，而研究一种新的物质的功能,首先要研究如何获得该物质提取该物质的有效成分，以及如何使用该物质才是最有力的工具因此我们制备的干细胞生长因子原液及其使用方法，对于人类研究干细胞美容领域、抗衰老领域就有非常重要的作用。

发明内容

本发明的目的是从人类脐带间充质干细胞通过胞外分泌途径分泌到培养基上清中的bFGF碱性成纤维细胞生长因子、EGF(表皮细胞生长因子)、 (KGF)角质细胞生长因子进行浓缩纯化，并通过一种独特的方式导入皮肤的真皮层而发挥作用。

本发明利用分子生物学技术，蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即 Western Blot方法检测不同干细胞代数培养基上清中bFGF、EGF、KGF的表达不同。

我们选择选取最利于皮肤优化延缓衰老的时间点以后，收集培养基上清，因为我们的培养基上清中富含各种化合物(无水氯化钙、硝酸铁、氯化钾、无水硫酸镁、无水磷酸二氢钠、丁二酸、丁二酸钠、以及酚红等)，所以我们选择透析法基本平衡掉这些化合物，只剩下浓度较高的大分子蛋白质。

由于脐带干细胞培养基上清的渗透压跟清洗液(0.09％生理盐水)的渗透压基本相同，所以单纯用透析法达不到浓缩及出掉大分子蛋白的目的，因此我们采用超滤离心的方法达到浓缩除掉大分子蛋白质的目的。

相较现有技术，本发明的干细胞生长因子原液的制备工艺方法对于人类研究干细胞美容领域、抗衰老领域就有非常重要的作用，利用分子生物学技术，本发明很好的提供了对于干细胞生长因子原液的获取方法，以及如何使用该物质才是最有利的工具，干细胞生长因子原液的制备工艺方法选取最利于皮肤优化延缓衰老的时间点提取富含多种细胞活性因子的干细胞原液，经现代生物技术再处理制成原液，具有除皱、美白、淡斑、紧致等多种抗衰功效。

附图说明

图1是本发明细胞培养状态对比系统图。

图2是本发明透析过程系统图。

图3是本发明内培养基上清透析浓缩图。

如下具体实施方式将结合上述附图进一步说明本发明。

具体实施方式

下面将结合附图对本发明作一具体介绍。

一种干细胞生长因子原液的制备工艺方法，其步骤包括；

S11第一步：利用Westernblot分子生物学实验技术定性检测干细胞培养基上清中是否含有bFGF、EGF、KGF蛋白，