[发明专利]一种检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法在审
| 申请号： | 201810951803.3 | 申请日： | 2018-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN109022582A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 邓亚光;韩晴 | 申请（专利权）人： | 宜昌美光硅谷生命科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京众达德权知识产权代理有限公司 11570 | 代理人： | 刘杰 |
| 地址： | 443005 湖北省宜昌市开发*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 葡萄糖转运蛋白 基因 检测 单个细胞 种检测 循环肿瘤细胞 基因分析 定量PCR检测 单细胞水平 不同基因 定量数据 多个基因 分离提取 基因表达 相关基因 预扩增 合成 细胞 分类 分析 研究 | ||
1.一种检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法，其特征在于：包括如下步骤：
1)分离提取单个细胞；
2)由所述单个细胞合成待检测基因的cDNA，所述待检测基因包含葡萄糖转运蛋白1基因；
3)PCR预扩增所述待检测基因；
4)定量PCR检测所述待检测基因的RNA表达量。
5)将待检测基因按不同细胞和/或不同基因分类，比较各待检测基因之间的RNA表达量的变化，获得单个细胞相关基因定量数据。
2.根据权利要求1所述检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法，其特征在于：所述步骤1)中，从血液中，分离提取单个细胞。
3.根据权利要求1所述检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述细胞为循环肿瘤细胞。
4.根据权利要求1所述检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述单个细胞，用细胞分解液处理分解细胞膜后，合成待检测基因的cDNA。
5.根据权利要求1或4所述检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述待检测基因还包括GAPDH，Beta Acting，UBB，RPS11，RPS18，CD45，EpCAM及CK8/18/19的基因。
6.根据权利要求1所述检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法，其特征在于：所述步骤3)中，所述PCR预扩增葡萄糖转运蛋白1的PCR扩增引物分别为：正向引物：ACGGGTCGCCTCATGCT；反向引物：TGTAGAACTCCTCGATCACCTTCTG。
7.根据权利要求1所述检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法，其特征在于：所述步骤4)中，所述定量PCR检测时，葡萄糖转运蛋白1表达水平分析的定量PCR所用引物分别为：正向引物：ACGGGTCGCCTCATGCT；反向引物：TGTAGAACTCCTCGATCACCTTCTG；探针：CTCCCTGCAGTTTGGCTACAACACTGGA。
8.根据权利要求1所述检测葡萄糖转运蛋白1基因分析的方法，其特征在于：所述步骤5)中，所述比较各待检测基因之间的RNA表达量的变化，包括：单细胞水平的葡萄糖转运蛋白1基因的RNA表达水平的比较，单细胞水平的包括葡萄糖转运蛋白1在内的多基因RNA表达水平的分析比较，和/或单细胞水平的、在持家基因表达量相同的条件下，单个基因或多个基因的RNA表达量的分析比较。
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