[发明专利]促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的诱导培养组合物及其应用

说明书

本发明涉及一种促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的诱导培养组合物及其应用。该诱导培养组合物包括细胞培养基及添加于细胞培养基的诱导因子，诱导因子包括植物血凝素、CD3抗体及CD28抗体，植物血凝素的终浓度为1μg/mL～10μg/mL，CD3抗体的终浓度为1μg/mL～10μg/mL，CD28抗体的终浓度为1μg/mL～10μg/mL。上述诱导培养组合物能够促进脾脏来源的CD8阳性T细胞大量增殖。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的诱导培养组合物及其应用。

背景技术

T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞。在胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内，在胸腺激素的诱导下分化成熟，成为具有免疫活性的T淋巴细胞。T淋巴细胞按照免疫应答中功能不同，可分为辅助T细胞(Th)、抑制性T细胞(TS)、效应T细胞(Te)和细胞毒性T细胞(Tc)。其中，细胞毒性T细胞又称为CD8阳性T细胞，表面表达CD8分子，是一类具有杀伤靶细胞的免疫细胞。CD8阳性T细胞在对抗外来的抗原或肿瘤细胞中起到非常重要的作用，被称为“杀手”T细胞。因此，如何提高CD8阳性T细胞的比例对保证T淋巴细胞的免疫活性至关重要。

目前，主要是通过提取外周血的免疫细胞并对其进行体外增殖来获得CD8阳性T细胞。然而外周血中淋巴细胞占比较少，不利于大量获取CD8阳性T细胞。一些研究通过在免疫细胞增殖的过程中加入白细胞介素-2等刺激因子来促进CD8阳性T细胞扩增，但是其获得的CD8阳性T细胞的量仍然较低，不能满足实际需求。

发明内容

基于此，有必要提供一种促进脾脏来源的CD8阳性T细胞大量增殖的诱导培养组合物及其应用。

一种促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的诱导培养组合物，包括细胞培养基及添加于所述细胞培养基的诱导因子，所述诱导因子包括植物血凝素、CD3抗体及CD28抗体，所述植物血凝素的终浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述CD3抗体的终浓度为1μg/mL～10μg/mL，所述CD28抗体的终浓度为1μg/mL～10μg/mL。

本研究通过在细胞培养基中加入适量的植物血凝素、CD3抗体与CD28抗体，能够有效地促进脾脏来源的CD8阳性T细胞大量增殖，从而获得大量的CD8阳性T细胞。经试验验证，脾脏来源的CD8阳性T细胞经上述诱导培养组合物培养后的细胞数是经未添加诱导因子的细胞培养基培养后的2倍～5倍。

在其中一个实施例中，所述植物血凝素的终浓度为4μg/mL～6μg/mL，所述CD3抗体的终浓度为4μg/mL～6μg/mL，所述CD28抗体的终浓度为4μg/mL～6μg/mL。

在其中一个实施例中，所述细胞培养基包括基础培养基、添加于所述基础培养基中的胎牛血清及添加于所述基础培养基中的丙酮酸钠，所述胎牛血清的体积百分含量为10％～15％，所述丙酮酸钠的终浓度为0.8mM～1.2mM。

在其中一个实施例中，所述基础培养基包括终浓度为1800mg/L～2200mg/L的含糖组分、终浓度为908mg/L～1247mg/L的氨基酸组分、终浓度为6955mg/L～7505mg/L的矿物元素组分及终浓度为33.6mg/L～45.7mg/L的维生素组分。

在其中一个实施例中，所述含糖组分包括葡萄糖。