[发明专利]促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的诱导培养组合物及其应用在审
申请号: | 201810938028.8 | 申请日: | 2018-08-16 |
公开(公告)号: | CN108865995A | 公开(公告)日: | 2018-11-23 |
发明(设计)人: | 饶秀茸;王康;易艳琼;李鹏;李泓彦 | 申请(专利权)人: | 深圳市拓普生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 潘霞 |
地址: | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 诱导培养 阳性T细胞 脾脏 细胞培养基 诱导因子 血凝素 增殖的 增殖 应用 | ||
1.一种促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的诱导培养组合物,其特征在于,包括细胞培养基及添加于所述细胞培养基的诱导因子,所述诱导因子包括植物血凝素、CD3抗体及CD28抗体,所述植物血凝素的终浓度为1μg/mL~10μg/mL,所述CD3抗体的终浓度为1μg/mL~10μg/mL,所述CD28抗体的终浓度为1μg/mL~10μg/mL。
2.根据权利要求1所述的诱导培养组合物,其特征在于,所述植物血凝素的终浓度为4μg/mL~6μg/mL,所述CD3抗体的终浓度为4μg/mL~6μg/mL,所述CD28抗体的终浓度为4μg/mL~6μg/mL。
3.根据权利要求1所述的诱导培养组合物,其特征在于,所述细胞培养基包括基础培养基、添加于所述基础培养基中的胎牛血清及添加于所述基础培养基中的丙酮酸钠,所述胎牛血清的体积百分含量为10%~15%,所述丙酮酸钠的终浓度为0.8mM~1.2mM。
4.根据权利要求3所述的诱导培养组合物,其特征在于,所述基础培养基包括终浓度为1800mg/L~2200mg/L的含糖组分、终浓度为908mg/L~1247mg/L的氨基酸组分、终浓度为6955mg/L~7505mg/L的矿物元素组分及终浓度为33.6mg/L~45.7mg/L的维生素组分。
5.根据权利要求4所述的诱导培养组合物,其特征在于,所述含糖组分包括葡萄糖。
6.根据权利要求4所述的诱导培养组合物,其特征在于,以质量份数计,所述氨基酸组分包括270份~310份的L-精氨酸、40份~60份的L-门冬酰胺、15份~25份的L-门冬氨酸、55份~75份的L-胱氨酸二盐酸盐、15份~25份的L-谷氨酸、7份~13份的甘氨酸、10份~20份的L-组氨酸、15份~25份的L-羟脯氨酸、40份~60份的L-异亮氨酸、40份~60份的L-亮氨酸、35份~45份的L-赖氨酸盐酸盐、10份~20份的L-甲硫氨酸、10份~20份的L-苯丙氨酸、15份~25份的L-脯氨酸、20份~40份的L-丝氨酸、15份~25份的L-苏氨酸、4份~6份的L-色氨酸、17份~28份的L-酪氨酸、260份~340份的L-谷氨酰胺及15份~25份的L-缬氨酸。
7.根据权利要求4所述的诱导培养组合物,其特征在于,以质量份数计,所述矿物元素组分包括8份~12份的硝酸钙、4.5份~5.5份的硫酸镁、65份~70份的磷酸二氢钠、38份~43份的氯化钾及580份~620份的氯化钠。
8.根据权利要求4所述的诱导培养组合物,其特征在于,以质量份数计,所述维生素组分包括0.1份~0.3份的生物素、0.2份~0.3份的D-泛酸钙、0.8份~1.2份的叶酸、30份~40份的肌醇、0.8份~1.2份的烟酰胺、0.8份~1.2份的盐酸吡哆醇、0.1份~0.3份的核黄素及0.8份~1.2份的盐酸硫胺素。
9.一种促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的方法,其特征在于,包括如下步骤:
将脾脏来源的CD8阳性T细胞接种于权利要求1~8任一项所述的诱导培养组合物中培养。
10.根据权利要求1所述的促进脾脏来源的CD8阳性T细胞增殖的方法,其特征在于,所述CD8阳性T细胞的接种量为0.9×105个/mL~1.5×105个/mL。
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