[发明专利]一种鉴别甲壳类氨基葡萄糖和微生物法氨基葡萄糖的方法

说明书

本发明提供了一种鉴别甲壳类氨基葡萄糖和微生物法氨基葡萄糖的方法，以同位素比值δ¹³C≤‑17‰和△δ∣C—N∣≥15两个参数作为评价指标，有效地提高了鉴别的正确性；本发明方法能有效地鉴别药物氨基葡萄糖的来源，为符合国家药品注册生产工艺的甲壳类氨基葡萄糖提供判定依据。

(一)技术领域

本发明涉及一种鉴别甲壳类氨基葡萄糖和微生物法氨基葡萄糖的方法。

(二)背景技术

氨基葡萄糖(Glucosamine)及其盐酸盐(Glucosamine Hydrochloride)，化学名为2-氨基 -2-脱氧-D-葡萄糖或其盐酸盐，是中国药品监督管理机构批准的药物活性成分，其制剂为OTC 药品。可用于治疗和预防全身所有部位的骨关节炎，包括膝关节、肩关节、髋关节、手腕关节、颈及脊椎关节如踝关节等，可缓解和消除骨关节的疼痛、肿胀等症状，改善关节活动的功能。

甲壳类氨基葡萄糖及其盐酸盐的生产工艺是用虾、蟹等甲壳类生物的外壳为原料，经脱钙、脱蛋白、去重金属等工序得甲壳素，再用盐酸脱乙酰基精制成氨基葡萄糖及其盐酸盐。此工艺是中国药品监督管理机构批准的注册法规工艺。

目前市场上出现的用微生物法生产的氨基葡萄糖及其盐酸盐产品不是中国药品监督管理机构批准的药品，其生产工艺是用微生物发酵的菌体(如发酵柠檬酸的残渣中含有的黑曲霉菌丝体)中提取甲壳素；或以大肠杆菌为工程菌发酵法得到N-乙酰氨基葡萄糖，再用酸脱乙酰基制得氨基葡萄糖及其盐酸盐。由于微生物法氨基葡萄糖的起始物料来源繁多，隐存的杂质种类、结构、性质和数量均不明确，难以用现行的产品质量标准控制，产品的安全性无法保证。

曾有日本特许公报[JP5687568]报导：当同位素比值δ¹³C＜-15‰或δ¹⁵N＞-3.5‰时产品为甲壳类氨基葡萄糖，该法同位素比值δ¹³C指标过于宽泛，δ¹⁵N指标不能正确识别不同来源的氨基葡萄糖。

(三)发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明提供了一种鉴别甲壳类氨基葡萄糖和微生物法氨基葡萄糖的方法，以同位素比值δ¹³C≤-17‰和△δ∣C—N∣≥15两个参数作为评价指标，有效地提高了鉴别的正确性。

本发明的技术方案如下：

一种鉴别甲壳类氨基葡萄糖和微生物法氨基葡萄糖的方法，所述方法为：

(1)待测样品定性

取待测样品，用红外光谱仪测定红外吸收光谱，并与氨基葡萄糖标准品的红外光谱图进行对照，确定待测样品为氨基葡萄糖；

(2)待测样品鉴别

取经过步骤(1)定性的待测样品，用同位素质谱法测定待测样品中元素C、N的同位素比值δ¹³C、δ¹⁵N，并由公式△δ∣C—N∣＝∣δ¹³C—δ¹⁵N∣计算△δ∣C—N∣的值；

当待测样品的δ¹³C≤-17‰，并且△δ∣C—N∣≥15，则其为甲壳类氨基葡萄糖；

当待测样品的δ¹³C≥-13‰，并且△δ∣C—N∣≤6，则其为微生物法氨基葡萄糖；

所述用同位素质谱法测定待测样品中元素C、N的同位素比值δ¹³C、δ¹⁵N的方法为：

取所述待测样品，经冷冻干燥或50℃烘干后，研磨至100目以下，称取0.1～0.5mg研磨后的样品置于锡杯中，紧密包裹后置于C/N元素分析仪联用同位素质谱仪中，在线测定样品中元素C、N的同位素比值δ¹³C、δ¹⁵N，检测条件为：